原発性胆汁性肝硬変における肝内胆管破壊の分子機構

原发性胆汁性肝硬化肝内胆管破坏的分子机制

• 批准号: 14770071
• 负责人: 原田 憲一
• 金额: $ 2.88万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770071/
• 关键词: 原発性胆汁性肝硬変; 自己抗体; 細胞; アポトーシス; 胆管細胞; ミトコンドリア抗体; 分子相同性; リポポリサッカライド; 細菌

原発性胆汁性肝硬変(PBC)の肝内胆管破壊の分子機構として、菌体成分に対する胆管細胞の反応性(自然免疫機構)について検討し、以下の成果を得た。1.ヒト胆管細胞の樹立:PBC(4例)の他、対照疾患3例の肝組織からヒト胆管細胞株を樹立した。2.ミトコンドリア抗体(AMA)と菌体成分との交差反応性:ウシ心筋ミトコンドリアおよび菌株(P.acnes, E.coli)を抗原としてウエスタン法を行い、血清中AMAの対応抗原を検出した。その結果、ウシ心筋ミトコンドリアおよび菌体を抗原としたパターンとは一致せず、菌体のミトコンドリア成分の他、多数の蛋白成分と反応性を示し、AMAは菌体成分に対する自然抗体の一部であることが明らかとなったが、菌種特異的な抗体でないことが示唆された。3.胆管細胞における自然免疫機構の解明:上記培養胆管細胞株を用いて、胆管細胞は細菌成分認識受容体であるToll-like receptor (TLR)2,3,4,5および関連分子であるMD-2、TLRの下流に存在する細胞内シグナル分子(MyD88,IRAK-1)を発現しており、さらにTLRリガンド(菌体の主要細胞壁成分であるリポポリサッカライド,ペプチドグリカン)の刺激でNF-κBの活性化およびTNF-αの産生を示した。また、胆管細胞はIFN-γ(Th1型サイトカイン)存在下でTLR発現が亢進し、さらにTLRリガンドに対する反応性も亢進した。以上より、胆管細胞はリポポリサッカライドなどの菌体成分を認識することにより炎症性サイトカインを産生し、またPBCの胆管周囲の環境であるTh1型サイトカイン優位な状態では菌体成分に対する感受性も亢進していることが示唆された。4.以上の結果より、胆管細胞は独自の自然免疫機構を有しており、また菌体に対する自然免疫現象がPBCの胆管病態形成に加担していると推測され、自然免疫の制御がPBCの新たな治療法となることが示唆された。

The molecular mechanism of intrahepatic bile duct disruption in idiopathic biliary cirrhosis (PBC) and the response of bile duct cells (natural immune mechanism) to bacterial components were investigated. 1. Establishment of cholangiocarcinoma cells:PBC(4 cases) and other diseases, 3 cases of liver tissue and cholangiocarcinoma cells. 2. AMA and cell composition were different from each other. The antigen-specific method was used to detect AMA in serum. The results show that AMA has a strong affinity for bacterial antigen and protein components, and that AMA has a strong affinity for bacterial antigen and protein components. AMA has a strong affinity for bacterial antigen and protein components. 3. Clarification of natural immune mechanisms in bile duct cells: The above mention indicates the activation of NF-κB and the production of TNF-α by Toll-like receptor (TLR) 2, 3, 4, 5 and related molecules present downstream of MD-2 and TLR in cultured bile duct cells. In the presence of IFN-γ(Th1-type receptor), the expression of TLR in bile duct cells was increased, and the expression of TLR in bile duct cells was increased. As mentioned above, bile duct cells are sensitive to bacterial components in the presence of inflammatory cells and in the environment surrounding the bile duct of PBC. 4. The above results suggest that the natural immune mechanism of bile duct cells alone may play an important role in the development of PBC.

项目成果

Harada K, Tsuneyama K, Yasoshima M, Kanemori Y, Ohta H, Masuda S, Onai N, Matsushima K, Nakanuma Y.: "Type1 and type2 memory T cells imbalance shown by expression of intrahepatic chemokine receptors relates to pathogenesis of primary biliary cirrhosis."He

Harada K、Tsuneyama K、Yasoshima M、Kanemori Y、Ohta H、Masuda S、Onai N、Matsushima K、Nakanuma Y.：“肝内趋化因子受体表达显示的 1 型和 2 型记忆 T 细胞失衡与原发性胆汁性肝硬化的发病机制有关

Iwata M, Harada K, Katayanagi K, Saito T, Kaneko S, Kobayashi K, Nakanuma Y.: "Apoptosis of murine cultured biliary epithelial cells induced by glycochenodeoxycholic acid involves Fas receptor and its ligand."Hepatol Res. 25(3). 329-342 (2003)

Iwata M、Harada K、Katayanagi K、Saito T、Kaneko S、Kobayashi K、Nakanuma Y.：“甘氨鹅脱氧胆酸诱导的小鼠培养胆管上皮细胞凋亡涉及 Fas 受体及其配体。”Hepatol Res。

Harada K, Ohira S, Isse K, Ozaki S, Zen Y, Sato Y, Nakanuma Y.: "Lipopolysaccharide activates nuclear factor-kappaB through toll-like receptors and related molecules in cultured biliary epithelial cells."Lab Invest. 83(11). 1657-1667 (2003)

Harada K、Ohira S、Isse K、Ozaki S、Zen Y、Sato Y、Nakanuma Y.：“脂多糖通过培养的胆管上皮细胞中的 Toll 样受体和相关分子激活核因子 kappaB。”Lab Invest。