CFLP法による血液型遺伝子型の解析

CFLP法血型基因型分析

• 批准号: 09770295
• 负责人: 那谷 雅之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770295/
• 关键词: CFLP; PCR; Duffy型; GC型; ABO式血液型; SSCP; PCR-direct sequencing; PCR-RFLP; MN式血液型

Duffy型、GC型、C8型のPCR-CFLP法による遺伝子型判定について試みた。Duffy型はTournamilleらの報告したプライマーを用いて、変異点を含む1105bp断片を増幅し、CFLPによるtypingを試みたが、至適条件が設定できず、更に検討する必要がある。GC型では伊東らが報告したプライマーを用いて、GC遺伝子のexon 5,8,11の増幅を行い、PCR-CFLP法によるtypingを試みたところ、至適条件の設定が困難で再現性にやや問題があり、PCR-RFLP法によるtypingの方が確実であり、優れていた。Zhangらが報告したC8遺伝子のexonを増幅するプライマーを用いてPCR-RFLP法によるtypingを試みたところ、C8A A,B,ABを識別する事ができた。ZhangらのDNA typingではexson specific PCRに次いでallele specific PCRを行わなければならなかったが、PCR-CFLP法ではexon specific PCR後、Cleavase処理、電気泳動を行うのみでよく、PCR-SSCP法と同程度の簡便さであり、簡便性・迅速性という点で優れていた。ABO式血液型遺伝子について、PCR-CFLP法、PCR-SSCP法、PCR-RFLP法、PCR-direct sequencing法について比較した。PCR-CFLP法は簡便性でPCR-SSCP法に次いで簡便であり、確実性でPCR-direct sequencing法、PCR-RFLP法に次いでいた。

For Duffy type, GC type, and C8 type, the <s:1> PCR-CFLP method is used to determine the 伝 subtype of による. Youdaoplaceholder2 による て て て try みた. Duffy type は Tournamille ら の report し た プ ラ イ マ ー を with い て, - contains different を む 1105 bp fragment を raised し, CFLP said に よ る typing を try み た が, set to optimum conditions が で き ず, more に beg す 検 る necessary が あ る. The GC type で で ITO らが reports the <s:1> たプラ たプラ らが らが を を を を を uses the て て, and the GC remnant 伝 sub-<s:1> exon Line 5,8,11 の rights of を い, PCR - CFLP said に よ る typing を try み た と こ ろ, difficulty to set optimum conditions の が で reproducibility に や や problem が あ り, PCR - RFLP method に よ る typing の party が indeed be で あ り, superior れ て い た. Zhang ら が report し た C8 heritage 伝 son の exon を rights of す る プ ラ イ マ ー を with い て PCR - RFLP method に よ る typing を try み た と こ ろ, C8A A, B, AB を recognition す る matter が で き た. Zhangら <s:1> DNA typingで <s:1> exson specific PCRに times <s:1> でallele specific PCRを row わなければならな わなければならな ったが, pCR-cFLp method で <s:1> exon specific After PCR, Cleavase 処 principle, the electric line 気 swimming を う の み で よ と く, PCR - SSCP method with degree of easy の さ で あ り, simplicity, rapid と い で う point れ て い た. Comparison of <s:1> た て て of ABO blood type sequeles に に て て て, PCR-CFLP method, PCR-SSCP method, PCR-RFLP method and PCR-direct sequencing method に て て た. The <s:1> simplicity of the PCR-CFLP method で the に times of the PCR-SSCP method で the で simplicity であ <e:1> and authenticity で the PCR-direct sequencing method and the PCR-RFLP method に times of the <s:1> で た た た.

项目成果

那谷雅之: "骨からのDNA抽出法3法の比較" 法医学の実際と研究. 40. 41-44 (1997)

Masayuki Natani：“三种骨头 DNA 提取方法的比较”法医学实践与研究 40. 41-44 (1997)。

木村敏夫: "法医試料からの簡便なHLA-DRB多型検出" 日本法医学雑誌. 52. 238-244 (1998)

Toshio Kimura：“从法医样本中轻松检测 HLA-DRB 多态性”《日本法医学杂志》52. 238-244 (1998)。

M. Nata: "ABO genotyping by PCR-direct sequencing" Jpn J Leg Med. 51. 1-5 (1997)

M. Nata：“通过 PCR 直接测序进行 ABO 基因分型”Jpn J Leg Med。

P. He: "Polymorphism of short tandem repeat (STR) loci PLA2, D3S2459, D8S315 (kw38) , CYP19, D3S1359, FGA and D8S1132 in the Japanese and Chinese populations" Tohoku J Exp Med. 183. 251-262 (1997)

P. He：“日本和中国人群中短串联重复 (STR) 位点 PLA2、D3S2459、D8S315 (kw38)、CYP19、D3S1359、FGA 和 D8S1132 的多态性”Tohoku J Exp Med。

那谷雅之: "親子鑑定におけるDNA多型検査と従来の血液型検査" 法医学の実際と研究. 41. 361-365 (1998)

Masayuki Natani：“亲子鉴定中的 DNA 多态性检测和常规血型检测”法医学实践与研究 41. 361-365 (1998)。