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赤血球特異的なアポトーシス調節因子の単離

红细胞特异性凋亡调节因子的分离

基本信息

批准号：
09770809
负责人：
中村幸夫
金额：
$ 1.79万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770809/
关键词：
赤血球アポトーシス bcl-x トランスジェニックマウス

项目摘要

エリスロポエチン(EPO)は赤血球系の増殖分化に必須のサイトカインである。EPO受容体(EPOR)には細胞内領域欠損型受容体(EPOR-T)が存在し、EPOR-Fからの増殖シグナルやアポトーシス抑制シグナルに対してドミナントネガティブに作用している。EPOR-FまたはEPOR-Tを過剰発現したトランスジェニックマウスを作製したところ、EPOR-Tを過剰発現したマウスは貧血となり、貧血誘導実験でも明らかに死に易い傾向を示した。得られたEPOR-Tトランスジェニックマウスの赤芽球においてはEPOR-Tの共存のためにEPO/EPOR系シグナルが弱く、従ってアポトーシス抑制シグナルも減弱している。このようなマウスにおいては、赤芽球のアポトーシスをなるべく回避するべく、フィードバック機構によって、何らかのアポトーシス抑制因子の発現が高くなっていたり、アポトーシスを誘導するような因子の発現が低下しているといった可能性がきわめて高い。このようなマウス由来の赤芽球細胞を用いて、目的とするアポトーシス調節分子の探索を試みた。平成9年度は以下の実験を行った。(1)cDNAライブラリーの作製。正常マウス胎児肝細胞および骨髄細胞より回収した赤芽球系細胞とEPOR-Tトランスジェニックマウスより回収した同様な細胞とを材料として一般的な方法でcDNAライブラリーを作製した。(2)サブトラクション法による新しい遺伝子のクローニング。得られたcDNAライブラリーを用いて、一般的な手法によってサブトラクションスクリーニングを行った。いくつかの候補遺伝子が得られたが、RNAの発現レベルを解析したところ明らかに発現レベルの異なるような遺伝子は未だに得られていない。スクリーニングを続行中である。

EPO (EPO) is an essential component of the proliferation and differentiation of the erythrocyte system. There are EPO receptors (EPOR) and intracellular domain-deficient receptors (EPOR-T) and EPOR-F. Suppressed reproductionに対してドミナントネガティブに Effect している. E POR-T is used to treat anemia and anemia, and to detect anemia-induced anemia and death.德られたEPOR-Tトランスジェニックマウスの红草においてはEPOR-TのcoexistenceのためにEPO/EPOR series シグナルが weak く, 従ってアポトーシス suppress シグナルも weakened している.このようなマウスにおいては、红草のアポトーシスをなるべくAvoidance, Fuse, Fuse, Fuseス inhibitory factor の発成が高くなっていたり、アポトーシスをinducing するThe factor of ような is low and the possibility is high. The origin of このようなマウスのred germ cells and the purpose of とするアポトーシス regulatory molecules are to be tested. In Heisei 9, the following activities will be completed. (1) cDNA ライブラリーの production. Normal fetal liver cells, bone marrow cells, recovery of red bud ball cells, EPOR-T トランスジェニッThe クマウスより recycling method is the same as the 様な cell とを material として general な method で cDNA ライブラリーを production した. (2)サブトラクション法による新しい伝子のクローニング. Get the られたcDNA ライブラリーを use いて, the general な technique によってサブトラクションスクリーニングを行った.いくつかの candidate addendum 伝子が得られたが、RNAの発appears レベルをanalytic したところ明らかに発出レベルのdifferentなるような伝子は不だに得られていない.スクリーニングを続行中である.