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多機能デジタル生体顕微鏡による妊娠子宮でのフリーラジカル生成動態と細胞障害の解析

使用多功能数字生物显微镜分析妊娠子宫自由基生成动态和细胞损伤

基本信息

批准号：
09771300
负责人：
田中守
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771300/
关键词：
一過性虚血・再潅流障害フリーラジカル妊娠

项目摘要

本年度は、多機能デジタル生体顕微鏡を用い、妊娠17日目での子宮胎盤循環での子宮血流流入・流出部の微小循環におけるフリーラジカル、細胞障害の生成過程を組織学的な固定処理を施さずにin vivoに近い状態で観察することを目的とし、研究を実施した。具体的には、研究補助によって購入した画像解析装置を用いて、高感度撮像撮像管(SIT)を用いた生体顕微鏡によってVTR記録されたNADH自家蛍光、DCFH蛍光(hydrogen peroxide感受性)、Rhodamine123(mitochondria membrane potential感受性)、PI(cell viability感受性)の子宮胎盤循環の虚血・再潅流(IR)前後での経時的変化を観察した。結果、子宮胎盤循環のIRは、子宮脱落膜部分の血管内皮細胞の障害をきたしFITC Dextran(MW100,000)の血管外漏出を促進し、血管透過性を上昇させることが判明した。また、DCFH蛍光輝度変化で観察されたIRにともなう子宮脱落膜のフリーラジカルの発生は、時間的・空間的に多様な部位で発生することが示唆された。また、これらの変化は、フリーラジカル消去酵素であるSODを虚血再潅流前に皮下投与することによって抑制されることが判明した。しかしながら、今回の実験系において、IRにともなう子宮脱落膜細胞でのNADH自家蛍光およびRhodamine123の蛍光輝度の変化は認められなかった。今後は、フリーラジカルの発生源についてさらに検討を加えるために、今回購入した画像解析装置を用い、白血球をRhodamine6Gで標識する事によって子宮胎盤循環でのIR障害における白血球の関与について、更に検討を加えていく予定である。

This year, multi-machine equipment can be used to monitor the health status of microphones, the flow of blood into the outflow part of the fetus on the 17th day of pregnancy, and the formation of cellular damage in the outflow part. this year, the fixed mechanism of in vivo is used to monitor the purpose of monitoring the flow of blood into the outflow, and to study the purpose of monitoring the flow of blood. The specific equipment and research help you to use the high-sensitivity camera camera tube (SIT) to record the NADH light, DCFH light (hydrogen peroxide sensitivity), Rhodamine123 (mitochondria membrane potential sensitivity) and PI (cell viability sensitivity) before and after the virtual blood reflow (IR). Results: fetal IR, partial vascular endothelial barrier, FITC Dextran (MW100000), extravascular leakage and vascular permeability were detected in the fetus. The temperature and DCFH light intensity measurement shows that the film is removed from the IR system, and the temperature distribution in the space of time is very high. The enzyme was removed, the SOD was depleted, and then the deficiency blood was subcutaneously injected before the bleeding. This time, it is important to know that the exfoliated membrane is located in the cell of the exfoliated membrane in IR. This time, the light intensity of the exfoliated membrane cell of the NADH is different from that of the Rhodamine123. In the future, you will need to know that the source of the students is to be used in the drawing parsing device, and that the white blood cell (Rhodamine6G) tag will be used in the future, and that the white blood cell (IR) will be damaged, and that the white blood cell will be detected.