多機能デジタル生体顕微鏡による妊娠子宮でのフリーラジカル生成動態と細胞障害の解析

使用多功能数字生物显微镜分析妊娠子宫自由基生成动态和细胞损伤

基本信息

批准号：
09771300
负责人：
田中守
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771300/
关键词：
一過性虚血・再潅流障害フリーラジカル妊娠

项目摘要

本年度は、多機能デジタル生体顕微鏡を用い、妊娠17日目での子宮胎盤循環での子宮血流流入・流出部の微小循環におけるフリーラジカル、細胞障害の生成過程を組織学的な固定処理を施さずにin vivoに近い状態で観察することを目的とし、研究を実施した。具体的には、研究補助によって購入した画像解析装置を用いて、高感度撮像撮像管(SIT)を用いた生体顕微鏡によってVTR記録されたNADH自家蛍光、DCFH蛍光(hydrogen peroxide感受性)、Rhodamine123(mitochondria membrane potential感受性)、PI(cell viability感受性)の子宮胎盤循環の虚血・再潅流(IR)前後での経時的変化を観察した。結果、子宮胎盤循環のIRは、子宮脱落膜部分の血管内皮細胞の障害をきたしFITC Dextran(MW100,000)の血管外漏出を促進し、血管透過性を上昇させることが判明した。また、DCFH蛍光輝度変化で観察されたIRにともなう子宮脱落膜のフリーラジカルの発生は、時間的・空間的に多様な部位で発生することが示唆された。また、これらの変化は、フリーラジカル消去酵素であるSODを虚血再潅流前に皮下投与することによって抑制されることが判明した。しかしながら、今回の実験系において、IRにともなう子宮脱落膜細胞でのNADH自家蛍光およびRhodamine123の蛍光輝度の変化は認められなかった。今後は、フリーラジカルの発生源についてさらに検討を加えるために、今回購入した画像解析装置を用い、白血球をRhodamine6Gで標識する事によって子宮胎盤循環でのIR障害における白血球の関与について、更に検討を加えていく予定である。

今年，我们使用多功能数字数字内显微镜进行了一项研究，以观察子宫血液流量的微循环和细胞损伤的产生，并在未经组织学固定的情况下，在接近体内的一个状态下，在接近体内的一个州，子宫血流和子宫胎盘循环中的子宫血流和流出。具体而言，使用带有研究辅助的图像分析设备，我们观察到NADH自动荧光，DCFH荧光，DCFH荧光（过氧化氢敏感性），Rhodamine123（线粒体膜电位敏感性）（线粒体膜电位敏感性）（线粒体敏感性）的变化，并使用pi（通过pi（通过irschemia和Repriast）录制的PI（ir）（ir）的pi（ir）（ir）启用了ir）（ir）。成像管（坐）。结果，发现子宫循环中的IR造成了叶状子宫内皮细胞的损害，从而促进了FITC右旋烷（MW100,000）的渗出和增加的血管渗透性。还提出，与DCFH荧光亮度变化相关的子宫deciDUA中的自由基发生在各种时间和空间上发生。还发现这些变化是通过皮下给药（一种自由基消除酶）在缺血再灌注之前皮下抑制的。然而，在当前的实验系统中，由于IR引起的NADH自动荧光和荧光亮度没有变化。将来，为了进一步研究自由基的来源，我们计划进一步研究白细胞在IR疾病中使用这次购买的图像分析设备通过将白细胞标记为Rhodamine6g的图像分析装置。