ラット好中球走化性因子(CINC)レセプターの炎症における役割

大鼠中性粒细胞趋化剂 (CINC) 受体在炎症中的作用

• 批准号: 09771971
• 负责人: 柴田 太
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09771971/
• 关键词: ラット; 炎症; 好中球; 走化性因子; CINC; MIP-2; 7回膜貫通型レセプター; クローニング

ラット好中球走化性因子であるCytokine-induced neutrophil chemoattractant(CINC)には、CINC-1、CINC-2α、CINC-2β、CINC-3/MIP-2の4種類が存在する。本研究では、一昨年クローニングしたCINCレセプター遺伝子のノーザン、及びウエスタンプロット解析を行い、またこの遺伝子を培養細胞において発現させ、リガンド特異性について検討した。1. CINCレセプター遺伝子をプローブとしてノーザンプロット解析を行ったところ、好中球では単一バンドが得られた。2. CINCレセプターのアミノ末端から46残基とProtein Aとの融合タンパクを作製し、これでウサギを免疫して抗血清を得た。この抗血清を用いてウエスタンプロット解析を行ったところ、好中球では38kdにメインバンドが46kdにマイナーバンドの2本のバンドが検出された。3. CINCレセプター遺伝子をヒト胎児腎臓由来HEK 293細胞に導入した。この形質転換細胞をCINC-1、CINC-2、CINC-3でそれぞれ刺激すると、細胞内カルシウム濃度の一過性の上昇が認められた。また、CINC-3は1/10の濃度でCINC-1やCINC-2と同程度の細胞内カルシウム濃度の上昇を引き起こした。この結果はラット好中球を用いた時と同じであり、また、各CINCによる脱感作現象も好中球での結果と一致した。以上の結果をまとめると、今回ク口ーニングしたCINCレセプターはすべてのCINCに対するレセプターであることが明らかとなった。

Youdaoplaceholder0 Cytokine-induced neutrophil chemoattractant(CINC) である, cinc-1, cinc-2 α, cinc-2 β, and cinc-3 /MIP-2 <s:1> four types が exist する. This study で は, YiZuo ク ロ ー ニ ン グ し た CINC レ セ プ タ ー posthumous son 伝 の ノ ー ザ ン and び ウ エ ス タ ン プ ロ ッ ト parsing を い, ま た こ の posthumous son 伝 を culture cell に お い て 発 now さ せ, リ ガ ン ド specificity に つ い て beg し 検 た. 1. CINC レ セ プ タ ー posthumous son 伝 を プ ロ ー ブ と し て ノ ー ザ ン プ ロ ッ ト parsing line を っ た と こ ろ, good in ball で は 単 a バ ン ド が must ら れ た. 2. CINC レ セ プ タ ー の ア ミ ノ end か ら 46 residues と Protein A と の fusion タ ン パ ク を as し, こ れ で ウ サ ギ を immune し て antiserum を た. こ の antiserum を with い て ウ エ ス タ ン プ ロ ッ ト parsing line を っ た と こ ろ, good in ball で は 38 kd に メ イ ン バ ン ド が 46 kd に マ イ ナ ー バ ン ド の 2 this の バ ン ド が 検 out さ れ た. 3. CINCレセプタ レセプタ 伝 伝 offspring をヒト fetal 児 kidney from which HEK 293 cells に are introduced into た た. を こ の form quality planning in cells, CINC - 2, CINC CINC - 1-3 で そ れ ぞ れ stimulus す る と, intracellular カ ル シ ウ ム concentration rising の transient の が recognize め ら れ た. ま た, concentration of CINC - 3 は 1/10 の で CINC 1 や CINC - 2 と の cells within the same extent カ ル シ ウ ム lead concentration rising の を き up こ し た. こ の results は ラ ッ ト good ball を in い た when と with じ で あ り, ま た, CINC に よ る in phenomenon も good off the ball で の と consistent し た. Above results の を ま と め る と, today back to ク ー ニ ン グ し た CINC レ セ プ タ ー は す べ て の CINC に す seaborne る レ セ プ タ ー で あ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Futoshi Shibata: "Gene structure,cDNA cloning and expression of the rat cytokine-induced neutrophil chemoatractant-2(CINC-2)gene" CYTOKINE. (in press). (1998)

Futoshi Shibata：“大鼠细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子-2（CINC-2）基因的基因结构、cDNA克隆和表达”细胞因子。