肺癌におけるテロメラーゼ活性を用いた微量癌細胞の検出系の確立

肺癌端粒酶活性微量癌细胞检测体系的建立

• 批准号: 10770672
• 负责人: 多賀 聡
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770672/
• 关键词: 肺癌; テロメラーゼ活性; 微量癌細胞; 気管支肺胞洗浄; 予後因子

本研究はテロメラーゼ活性を測定することで大量の正常細胞中に存在する極めて微量な癌細胞の検出を確立し,肺癌治療における術前診断の補助,術後治療計画の指標とすることを目的に計画した。(1)肺癌原発腫瘍組織内のテロメラーゼ活性を,TRAP(Telomerase Repeat Amplification Protocol Assay)の原法を用いて,肺癌切除107例の癌部と正常非癌肺組織から測定した。正常非癌肺組織からは全例テロメラーゼ活性は検出できなかった。一方,肺癌原発腫瘍組織では107例中89例(83.2%)でテロメラーゼ活性が検出された。小細胞肺癌は全例(4/4),非小細胞肺癌では103例中85例(82.5%)でテロメラーゼ活性が検出された。非小細胞肺癌の組織型では検出率に差はなかったが,病期ではIIIB,IV期の進行例では全例に検出された。このようにテロメラーゼ活性は肺癌組織において約80%に検出されたことから,微量癌細胞の検出系における有用なマーカーであることが示された。(2)さらに上記(1)の結果に基づき対象症例の予後の解析を行った結果,テロメラーゼ活性の有無は多変量および単変量解析においても独立した予後因子であることが示された(単変量;p=0.0058,多変量;PR=8.62,p=0.035)。(3)次に肺癌患者における気管支肺胞洗浄液(BAL)中のテロメラーゼ活性の測定をTRAP-eze ^<TM> Telomerase Detection Kitを用いたnon-RI法で行った。その結果,internal controlの発現に対して,BAL中(10^3-10^4cells)のテロメラーゼ活性の発現は弱く,BAL細胞数をさらに増加(10^5-10^6cells)させることで比較的強い発現をみとめた。しかい臨床検体(血液,喀痰など)に応用するには,さらに適切な検出条件を決定する必要がある。癌化肺癌細胞株とリンパ球を用いたテロメラーゼ活性の検出感度の検討も含めて今後も解析を進める予定である。このようにテロメラーゼ活性は肺癌の存在を示唆する有用なマーカーではあるが,微量癌細胞の検出系の確立には今後さらなる検討が必要と考えられる。

This study aims to determine the activity of tumor cells in a large number of normal cells, to establish the detection of cancer cells in trace amounts, to supplement preoperative diagnosis in lung cancer treatment, and to establish indicators for postoperative treatment planning. (1)TRAP(Telomerase Repeat Amplification Protocol Assay) was used to detect the activity of TRAP in lung cancer tissues from 107 lung cancer patients and normal lung tissues. Normal non-cancerous lung tissue is not active. 89 cases (83.2%) of the 107 cases of lung cancer original tumor tissue showed high activity. All cases of SCLC (4/4) and 85 cases (82.5%) of NSCLC (103 cases) were diagnosed with high activity. Non-small cell lung cancer tissue type detection rate is different, disease stage is IIIB,IV progress cases are all detected About 80% of lung cancer cells were detected in this study, and trace amounts of cancer cells were detected in this study. (2)The results of the above note (1) show that the baseline analysis of the symptoms shows that there is no change in the amount of activity and the amount of analysis is independent of the amount of analysis (single amount;p=0.0058, multiple amount;PR= 8.62, p =0.035). (3)Secondly, the determination of telomerase activity in bronchial lung lavage fluid (BAL) from lung cancer patients was performed using <TM>the non-RI method using the TRAP-eze Telomerase Detection Kit. As a result, the development of internal control was relatively weak in BAL (10^3- 10^4 cells), and the number of BAL cells increased (10^5- 10^6 cells). Clinical examination (blood, sputum) is necessary to determine the appropriate conditions. Cancerized lung cancer cell lines are used in the detection of sensitivity, including future analysis. This activity is useful for establishing the presence of cancer cells.