造血幹細胞におけるテロメラーゼ活性の制御機構の解析と制御分子の単離の試み

造血干细胞端粒酶活性调控机制分析及调控分子分离尝试

• 批准号: 14657245
• 负责人: 金倉 譲
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657245/
• 关键词: テロメラーゼ; 造血幹細胞; c-Myc; 自己複製; 不死化; Notch; HOXB4; サイトカイン; 細胞接着; TERT

テロメアとは染色体末端部分に存在する(TTAGGG)nの繰り返し配列である。DNA合成の際に再生されず、細胞分裂を繰り返すと短縮していき、細胞分裂の回数を規定している。造血幹細胞は自己複製能と多分化能を有し、個体の生存期間、造血幹細胞集団を維持しつつ血液細胞を供給するが、この細胞集団は一般の正常体細胞とは異なり、テロメア配列を補充するテロメラーゼ活性を有している。本研究においては、造血幹細脚の自己複製・不死化機構とその際のテロメラーゼ活性の制御機構について解析を行い、以下の結果を見出した。1.マウス骨髄より単離したLin^-Sca-1^+の造血幹細胞に活性型NotchやHOXB4を導入すると、自己複製がもたらされ、この際にはテロメラーゼ活性の上昇が認められた。2.Notch、HOXB4による自己複製の際の各種細胞周期制御分子の発現変化を調べたところ、G1/S期に関わる細胞周期制御分子の中でcyclin D1やE2F1などと比較してc-mycの発現上昇が最も早期から認められた。また、両分子はルシフェラーゼアッセイにおいてC-mycプロモーターを活性化した。3.マウス造血幹細胞に4-hydrxytamoxifen(4-HT)によってc-Mycの活性が誘導可能なc-Mycと変異型エストロゲン受容体(ERT)のキメラ分子c-Myc/ERTを導入したところ、c-Myc/ERTは造血幹細胞に自己複製をもたらし、テロメラーゼ活性を上昇させた。以上の結果から、Notch、HOXB4による造血幹細胞の自己複製、テロメラーゼ活性の制御において、c-Mycが中心的な役割を担うと考えられた(J.Biol.Chem.,in revision)。

At the end of the テロメアと テロメアと chromosome に, there is a する(TTAGGG)n n coix <s:1> return to the coid coordination である. DNA synthesis <s:1> interに regeneration されず, cell division を coirculation すと shortening <s:1> て て に に を, cell division <s:1> cycle を regulation て て る る. は hematopoietic stem cells can replicate と much differentiation can have し を, individual の survival period and hematopoietic stem cell collection 団 を maintain し つ つ blood cells を supply す る が, こ の cells sets 団 は general の normal somatic と は different な り, テ ロ メ ア match column を supplement す る テ ロ メ ラ ー ゼ active を have し て い る. This study に お い て は, hematopoietic stem feet の copy die change institutions と そ の interstate の テ ロ メ ラ ー ゼ active の system royal institution に つ い て parsing を い, following の results を see し た. 1. マ ウ ス bone marrow よ り 単 from し た Lin ^ - ^ Sca - 1 + の hematopoietic stem cells に activity type Notch や HOXB4 を import す る と, their reproduction が も た ら さ れ, こ の interstate に は テ ロ メ ラ ー ゼ active の rise が recognize め ら れ た. 2. Notch, HOXB4 に よ る their copy の interstate の various cell cycle system of royal molecular の 発 now - the を adjustable べ た と こ ろ, G1 / S phase に masato わ る cell cycle in the royal molecular の で cyclin D1 や E2F1 な ど と compare し て c - myc の 発 now rising が most early も か ら recognize め ら れ た. ま た, struck molecular は ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ に お い て C - myc プ ロ モ ー タ ー を activeness し た. 3. マ ウ ス hematopoietic stem cell に hydrxytamoxifen 4 - (4 - HT) に よ っ て c - Myc が induced の activity may be な c - Myc と - alien エ ス ト ロ ゲ ン by let body (ERT) の キ メ ラ molecular c - Myc/ERT を import し た と こ ろ, c - Myc/ERT に themselves copying を は hematopoietic stem cells The activities of たら たら and テロメラ ゼ ゼ を increase させた. の above results か ら, Notch, HOXB4 に よ る hematopoietic stem cells の their reproduction, テ ロ メ ラ ー ゼ の active suppression に お い て, c - Myc が な battle in the center of the cut を bear う と exam え ら れ た (J.B iol. Chem., in revision).

项目成果

Zhang, X. et al.: "Constitutively activated Rho GTPases regulate the growth and morphology of hairy cell leukemia (HCL) cells."Int.J.Hematology. 77. 263-273 (2003)

张，X. 等人：“组成型激活的 Rho GTP 酶调节毛细胞白血病 (HCL) 细胞的生长和形态。”Int.J.Hematology。

Matsumura, I. et al.: "Cell cycle regulation in hematopoietic stem cells."Res.Adv.in Blood. 2. 39-49 (2003)

Matsumura, I. 等人：“造血干细胞的细胞周期调节。”Res.Adv.in Blood。

Matsumura I, et al.: "Roles for E2F1 and c-Myc in the regulation of cell growth and survival"Cell Cycle. 2. 333-338 (2003)

Matsumura I 等人：“E2F1 和 c-Myc 在细胞生长和存活调节中的作用”细胞周期。

Tanaka S, et al.: "Autoantibodies against muscarinic cholinergic receptor in chronic fatigue syndrome"Int.J.Mol.Med.. 12. 225-230 (2003)

Tanaka S，等：“慢性疲劳综合征中针对毒蕈碱胆碱能受体的自身抗体”Int.J.Mol.Med..12.225-230(2003)

Ueda S, et al.: "Critical roles of c-kit tyrosine residues 567 and 719 in stem cell cellfactor-induced chemotaxis : contribution of src family kinase and PI3-kinase on calcium mobilization and cell migration"Blood. 100. 3342-3349 (2002)

Ueda S 等人：“c-kit 酪氨酸残基 567 和 719 在干细胞细胞因子诱导的趋化性中的关键作用：src 家族激酶和 PI3 激酶对钙动员和细胞迁移的贡献”血液。