気道平滑筋に及ぼす環境変化と麻酔薬との相互作用ならびに作用機序の解明

阐明环境变化与麻醉剂对气道平滑肌的相互作用及其作用机制

• 批准号: 10770762
• 负责人: 山蔭 道明
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770762/
• 关键词: 気道; 平滑筋; カルシウムイオン; 低温; カルシウムチャネル; パッチクランプ法; 蛍光指示薬

提出した研究計画に従い,本年度は気道平滑筋収縮に対する環境変化,とくに低温暴露の影響について観察した.研究費は低温環境を作製するためにバイオウォーマー(ナリシゲ)を購入したほか,単離細胞等を作製する際に必要な消耗品等に充当した.本年度は前年度の平滑筋張力と[Ca^<2+>]iの同時測定の結果を踏まえてパッチクランプ法による電位依存性カルシウムチャンネル(VDC)活性の測定を行った.材料として雑種成犬およびブタの気管平滑筋組織を用いた.平滑筋組織をコラゲナーゼなどの酵素でインキュベートし,気管平滑筋の単離細胞を得た.得られた気管平滑筋細胞を用いて,倒立顕微鏡下で細胞をパッチし,パッチクランプアンプで膜電位固定した.ホールセルモードにてVDCを介して流入するカルシウムの内向き電流を得た.温度変化は37℃,31℃とし,一定の変化を得た後吸入麻酔薬イソフルランとセボフルランを暴露し,カルシウム電流の変化を観察した.低温暴露はカルシウムの内向き電流を有意に抑制した.この効果は吸入麻酔薬暴露時でも同様であった.不活性化曲線も有意に左方にシフトした.つまり,前年度に得られた低温暴露による[Ca^<2+>]iの低下の結果と一致する結果が得られた.低温暴露による[Ca^<2+>]iの低下の原因として,細胞膜電位依存性カルシウムチャネルの抑制が関与していることが考えられた.その効果は活性化ならびに不活性化状態でも観察された.受容体刺激薬による収縮の際に低温暴露が収縮を増強させるのは,カルシウムイオンに関与しない因子が考えられた.この結果は,喘息患者が低温暴露時に喘息発作を引き起こしやすいことと一致する.

根据提交的研究计划，今年我们观察到气道平滑肌收缩的环境变化，尤其是低温暴露的影响。研究基金购买了BioWarmers（Narishige）来创建低温环境，还将它们用作生产隔离细胞等所需的消耗品。今年，我们使用贴片夹方法观察到了依赖电压依赖的钙通道，同时考虑了上一年平滑肌肉紧张和[Ca^<2+>] I的同时测量结果。测量NEL（VDC）的活性。杂种狗和猪的气管平滑肌组织用作材料。将平滑肌组织与诸如胶原酶等酶的酶孵育，以获得气管平滑肌的孤立细胞。将细胞在倒置的显微镜下进行打磨，并用膜电位固定在贴片夹放大器。在全细胞模式下获得了流过VDC的钙的内电流。温度的变化在37°C和31°C下，获得了恒定的变化，暴露于吸入麻醉药异氟烷和七氟烷后，观察到钙电流的变化。低温暴露显着抑制了钙的内部电流。这种作用也类似于诱导麻醉暴露。灭活曲线也显着转移到左侧。换句话说，由于上一年获得的低温暴露，结果与[Ca^<2+>] I下降的结果一致。低温暴露据认为，由于[Ca^<2+>] I的降低，[Ca^<2+>] I的减少参与了细胞膜电压依赖性钙通道的抑制。在激活和灭活状态中也观察到了这种效果。据认为，当低温暴露与受体兴奋剂有关时，增强收缩的因素。该结果与以下事实一致：哮喘患者在暴露于冷温度暴露时容易受到哮喘发作。

项目成果

Yamakage M: "Role of intracellular Ca^<2+> stores in the inhibitory effect of halothane on airway smooth muscle contraction" Anesthesiology. 89・1. 165-173 (1998)

Yamakage M：“细胞内Ca^<2+>储存在氟烷对气道平滑肌收缩的抑制作用中的作用”麻醉学89・1（1998）。

Yamakage M: "Role of intracellalar Ca^<2+> stores in the inhibitory effect of halothane on airway smooth muscle contraction"Anesthesiology. 89・1. 165-173 (1998)

Yamakage M：“细胞内Ca^2+储存在氟烷对气道平滑肌收缩的抑制作用中的作用”麻醉学89·1（1998）。

Yamakage M: "Low-temperature modification of the inhibitory effects of volatile anesthetics on airway smooth muscle contraction in dogs"Anesthesiology. 93・(掲載予定). (2000)

Yamakage M：“低温改良挥发性麻醉剂对狗气道平滑肌收缩的抑制作用”麻醉学93·（待出版）。

山陰 道明: "麻酔科医と基礎研究-気道平滑筋を中心に" 南江堂出版株式会社, 220 (1999)

山阴道明：《麻醉医师和基础研究——关注气道平滑肌》南光堂出版社，220（1999）

山蔭 道明: "麻酔科医と基礎研究-気道平滑筋を中心に"南江堂出版株式会社. 220 (9905)

Michiaki Yamakage：《麻醉医师和基础研究 - 关注气道平滑肌》 Nankodo Publishing Co., Ltd. 220 (9905)