テロメレース遺伝子導入による水疱性角膜症の治療

端粒酶基因转移治疗大疱性角膜病

• 批准号: 10770936
• 负责人: 江島 哲至
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770936/
• 关键词: 水疱性角膜症; 角膜内皮細胞; テロメレース; 遺伝子導入; エレクトロポレーション

テロメレースを利用して水庖性角膜症の治療法を模索するため、(1) ウサギ角膜内皮細胞を分離培養し、Telomeric Repeat Amplification Protocol(TRAP)assayでそのテロメレース活性を測定した。コントロールに用いたヒトメラノーマ細胞株ではあきらかなteromeric repeatの延長反応がみられたが、ウサギ角膜内皮細胞にはテロメレース活性はほとんど検出されず、17-29回の分裂後に増殖を停止した。剖検眼から得たヒト角膜内皮細胞は状態の良い物を得るのが困難であったが、暫定的な実験ではやはりテロメレース活性は検出できず、角膜内皮細胞の非増殖性と合致する結果であった。(2) ウサギ角膜内皮細胞に対しエレクトロポレーションで遺伝子を導入する条件設定するためLacZ遺伝子を導入した。5μgのLacZプラスミドDNAをウサギ前房内に注入し、角膜用に作成した電極で角膜表面から電気パルスをかけたところ、電極間隔1mmで、電圧25Vのときに最も広いLacZ発現面積が得られた。さらに次年度は、テロメレースの逆転写酵素部分(hTERT遺伝子)を培養角膜内皮細胞および生体のウサギ角膜内皮に導入を試みる予定である。

The method for the treatment of hydrokeratosis was used to determine the activity of keratosis, (1) isolation and culture of corneal endothelial cells, and Telomeric Repeat Amplification Protocol (TRAP) assay cell culture. The cell lines were used to lengthen the cell cycle, the corneal endothelial cells were isolated from the cornea, and the colonization stopped after the mitosis of 17-29 cells. In the eyes of the dissected eyes, the corneal endothelium of the cornea was found to be in the shape of a cell, and the corneal endothelium was not proliferative. The results showed that the corneal endothelial cells were not proliferative. (2) the corneal endothelium cell cycle, the corneal endothelial cell, the corneal endothelial cell, the corneal endothelial cell, 5 μ g