大腸硫酸転移酵素群のcDNAクローニング及びその生物学的意義の解明

结肠磺基转移酶的 cDNA 克隆及其生物学意义的阐明

• 批准号: 10780373
• 负责人: 瀬古 玲
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Sasaki Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780373/
• 关键词: 硫酸転移酵素; 大腸粘膜; 大腸癌; ガラクトース転移酵素; セレクチン; 硫酸化ムチン

I)大腸粘液癌におけるGlcNAc:→6硫酸転移酵素本研究者は酵素学的手法により、ヒト大腸癌において2種類のGlcNAc:→6硫酸転移酵素が存在することを明らかにした。一方はコア2及びGlcNAcβ1→2Man糖鎖を良い基質とし、癌化に伴い酵素活性が減少する酵素であった。もう一方は、コア2、コア3、GlcNAcβ1→2Man、GlcNAcβ1→3Galβ1→4Glcなどの幅広い基質特異性を有し、粘液癌もしくは粘液蓄積が多く見られる分化型癌において酵素活性が見い出される酵素であった。後者の酵素の発現は粘液癌の診断に応用できる可能性を示しており、現在cDNAクローニングを進行中である。ii)GlcNAc-6-O-硫酸:β1→4ガラクトース転移酵素の脂質要求性本研究者はヒト及びブタ大腸粘膜中にGlcNAc-6-O-硫酸に特異的に作用するβ1→4ガラクトース転移酵素を見い出している。本研究者は本酵素を精製していく過程において酵素活性が消失する現象を見い出し、かつD-スフィンゴシンを反応系に加えることで酵素活性が回復することを明らかにした。この脂質要求性はD-スフィンゴシン特異的でリン脂質及びセラミドでは活性の回復は見られなかった。この結果から、本酵素はD-スフィンゴシンの一級アミノ基を認識していることが考えられる。

I) GlcNAc:→6 Sulphate Transferase in Colorectal Mucinous Carcinoma The present study demonstrated the presence of GlcNAc:→6 Sulphate Transferase in Colorectal Carcinoma by enzymic methods. One side of the enzyme chain is called GlcNAcβ1→2Man, and the other side of the enzyme chain is called GlcNAc β 1 → 2 Man. The enzyme activity in differentiated cancer is more frequent than in normal cancer. The development of the latter enzyme has been shown to be useful in the diagnosis of mucinous carcinoma, and the cDNA library is currently in progress. ii)GlcNAc-6-O-Sulfuric Acid:β1 → 4-glucuronidase Lipid Requirement In this study, GlcNAc-6-O-Sulfuric Acid was specifically activated in the colon mucosa. The researchers found that the enzyme activity disappeared during the purification process, and the enzyme activity recovered. The lipid requirement is to restore the activity of the lipid and the activity of the lipid. This enzyme is a D-type enzyme.

项目成果

Hara-Kuge, et al.: "Vesicular-integral membrane protein, VIP36, recognizes high-mannose type glycans containing α1→2 mannosyl residues in MDCK cells" Glycobiology. in press.

Hara-Kuge 等人：“囊泡整合膜蛋白，VIP36，识别 MDCK 细胞中含有 α1→2 甘露糖基残基的高甘露糖型聚糖”糖生物学正在出版。

Seko A.et al.: "Biochemical difference between two types of N-acetylglucosamine : →6sulfotransferases in human colonic adenocarcinomas and the adjacent normal mucosa"Glycobiology. (in press). (2000)

Seko A. 等人：“两种 N-乙酰氨基葡萄糖之间的生化差异：→人类结肠腺癌和邻近正常粘膜中的 6 种磺基转移酶”，糖生物学（2000 年出版）。

Fukushima, K.et al.: "Elevation of Gal : α2→6 sialyltransferase and Gal : α1→2 fucosyltransferase activities in human choriocarcinoma" Cancer Res.58. 4301-4306 (1998)

Fukushima, K. 等人：“人类绒毛膜癌中 Gal：α2→6 唾液酸转移酶和 Gal：α1→2 岩藻糖基转移酶活性的升高”Cancer Res.58（1998）。

Seko A.et al.: "Identification of two discrete peptide : N-glycanases in Oryzias Latipes during embryogenesis"Glycobiology. 9. 887-895 (1999)

Seko A.等人：“两种离散肽的鉴定：胚胎发生过程中 Oryzias Latipes 中的 N-聚糖酶”糖生物学。

山下克子他: "基礎生化学実験法"(株)東京化学同人 (印刷中). (2000)

山下胜子等：《基本生化实验方法》东京化学同人株式会社（2000年出版）。