線虫C.エレガンスのリアノジン受容体と相互作用するタンパク質の同定

与线虫秀丽隐杆线虫的兰尼碱受体相互作用的蛋白质的鉴定

• 批准号: 10780422
• 负责人: 作部 保次
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780422/
• 关键词: C.エレガンス; リアノジン受容体; 2-ハイブリッド法; 酵母2-ハイブリッド; 線虫

リアノジン受容体は神経後膜からの刺激を細胞質側の"足"構造で受け、筋小胞体からカルシウムを放出する。哺乳類では骨格筋型・心筋型・脳型の3種類が存在し、それぞれ発現組織と活性の制御機構が異なっている。線虫C.エレガンスのリアノジン受容体(CeRYR)は第5染色体のunc-68遺伝子がコードする一種類で、リアノジン受容体の制御機構を調べる簡単なモデル系として利用できる。運動不良のe540,x14変異と麻酔薬ケタミンに応答異常を示す変異kh30変異の変異部位が明らかにされており、このうちkh30変異はPKCによる推定リン酸化部位にアミノ酸置換が生じている。私はリアノジン受容体の活性制御に関わる新規の蛋白質を単離する目的で、CeRYRと相互作用する蛋白質を酵母の2-ハイブリッド系を用いて探索した。N末の細胞質側領域を用いた初期のスクリーニングでは、転写因子など非特異的と思われる分子が多く得られたため、スクリーニングに用いる領域をkh30変異周辺およびC末のチャネル領域に限定した。その結果、kh30変異周辺とはERM(Ezrin/Radixin/Moesin)ファミリー蛋白質の線虫ホモログが、またC末の膜貫通領域のM1/M2ループとはヒトSGT蛋白質の線虫ホモログが特異的に相互作用した。さらに線虫ERM蛋白質が、CeRYRと同じく筋小胞体に存在する、線虫カルゼケストリンとも相互作用することを明らかにした。これまでに線虫SGT蛋白質をコードする遺伝子R05F9.10について発現解析を行い、主に腸で発現することを明らかにした。現在、線虫ERM蛋白質をコードする遺伝子C01G8.5の発現解析を進めており、筋肉細胞で発現しているCeRYRとの機能的関連の有無を調べている。

The receptor is stimulated by the posterior membrane of the brain, and the "foot" structure on the cytoplasmic side is stimulated by the release of the receptor from the muscle cell. There are three types of mammals: skeletal muscle type, cardiac muscle type and abdominal muscle type. The receptor of C. reuteri (CeRYR) is a member of the unc-68 gene of chromosome 5, and the regulatory mechanism of CeRYR is a simple system. Dyskinesias e540,x14, abnormal response, abnormal response To explore the new protein expression system related to the regulation of receptor activity in yeast and its interaction with CeRYR. The cytoplasmic domain of the N end is used in the initial stage, and the writing factor is used in the non-specific stage. The molecule is used in the initial stage, and the cycle is used in the final stage. As a result, kh30 is different from ERM(Ezrin/Radixin/Moesin), which is a specific interaction between SGT protein and M1/M2 protein. The protein, CeRYR, and the interaction between the two proteins are discussed in detail. The protein of SGT of this kind of worm is detected by R05F9.10, and the protein is detected by R05F9.10. Now, the analysis of the expression of protein C01G8.5 in mitochondrial ERM protein has been carried out. The relationship between the function of CeRYR and the expression of ERM protein in muscle cells has been modulated.

项目成果

作部 保次: "線虫ゲノムデータベース利用のための基礎知識"生物物理. 39(5). 322-324 (1999)

Yasuji Sakube：“使用线虫基因组数据库的基本知识”生物物理学 39(5) (1999)。