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四肢形態形成におけるFGF10の役割の解明

阐明 FGF10 在肢体形态发生中的作用

基本信息

批准号：
10780462
负责人：
大内淑代
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780462/
关键词：
FGF Fibroblast Growth Factor 線維芽細胞増殖因子形態形成四肢形成発生肢芽 FGF10

项目摘要

四肢の形態形成のメカニズムを解明する目的で,肢形態形成に重要である線維芽細胞増殖因子(FGF10)に着目して研究を行ってきた。FGF10は,ニワトリ胚側腹部より過剰肢を誘導し,予定胚芽形成領域に発現していることから,肢形成のトリガー因子であると考えられていた。さらに昨年,FGF10機能喪失(KO)マウスでは四肢が全くできないことから,FGF10が内在性の四肢形成因子として実際に作用していることが証明された。本年度は、四肢形態形成におけるFGF10の役割をさらに解明するために,FGF10 KOマウス胚を用いてFGF10の標的遺伝子をRepresentative Difference Analysis(RDA)法により単離し,FGF10のシグナルカスケードを明らかにすることを試みた。胎齢14日のKO胚(ホモ接合体)と野生型胚よりmRNAを抽出,cDNAを合成し,それぞれドライバー,テスターcDNAとしてRDA法を行った。野生型にのみ発現しFGF10 KOマウスには発現しないDNA断片について,現在シークエンス解析中である。現在までのところ65クローンについて解析した結果,シグナル伝達関係の遺伝子が27,細胞周期に関与する遺伝子が19,諸酵素遺伝子が6,膜タンパク質遺伝子が4,既知の塩基配列とホモロジーのない遺伝子が9クローン単離された。また,FGF10 KOマウスの表現型の詳細な解析を行い,FGF10が四肢の形成だけでなく,肺,唾液腺,膵臓,腎臓,毛,歯,下垂体など様々な器官の形態形成に必要であることを明らかにした。

To clarify the morphology of limbs, the study of FGF10, an important factor in limb morphogenesis, was carried out. FGF10 is a factor in the development of embryonic flank and limb formation. Last year, FGF10 lost function (KO), FGF10 was proved to be an intrinsic limb-forming factor. This year, FGF10 is used in limb morphogenesis, and Representative Difference Analysis(RDA) method is used to analyze the differences between FGF10 and FGF10. mRNA was extracted and cDNA was synthesized from wild type KO embryos on day 14. wild-type DNA fragment detection and analysis The results of analysis showed that there were 27 genes related to cell cycle, 19 genes related to cell cycle, 6 genes related to enzymes, 4 genes related to membrane, and 9 genes related to known gene alignment. In the detailed analysis of FGF10 KO phenotype,FGF10 is necessary for the formation of limbs, lungs, salivary glands, kidneys, hair, teeth, and pituitary organs.