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FGF10ノックアウトマウスを用いたFGF10関連器官形成遺伝子の解析

使用 FGF10 敲除小鼠分析 FGF10 相关器官发生基因

基本信息

批准号：
12026221
负责人：
大内淑代
金额：
$ 1.79万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、脊椎動物の器官形成の分子プログラムを理解するために、FGF10ノックアウトマウス(KO)を利用して、器官形成に関与する新規あるいは既知の形態形成遺伝子を単離同定し、FGF10の下位ではたらく遺伝子の全体像を明らかにすることを目的とした。まず、FGF10の器官発生における役割を明確にするために、昨年より行っているFGF10KOマウスの解析を継続した(Sekine et al.,1999,Nature Genetics;Ohuchi et al.,2000,BBRC).本マウスでは、上皮-間葉相互作用により形成されるほとんどの組織・器官に程度の差はあるが,異常が観察された.そこで,その異常とFgf10の発現部位との関係をさらに明確にするために,組織切片を用いたin situ hybridizationを行なった.その結果,Fgf10は主に間葉の組織に発現していた.しかし,脳下垂体や耳胞では上皮にも発現することが観察された.これらの結果から,FGF10は例外もあるが,主に上皮-間葉相互作用の上皮に作用する間葉の因子であることがより明確になった.先に我々は,Fgf10が四肢が形成される領域に特異的に発現し,ニワトリの側腹部に過剰な肢(Dasoku〕を誘導することを見出し,FGF10が四肢形成を誘導する初期因子の一つであることを報告した(Ohuchi et al.,1997,Development)。四肢は器官形成のよいモデル系である。しかし,FGF10の標的遺伝子については,まだほとんど解明されていなかった.そこで,PCRを用いた引き算法により,FGF10KOマウスを用いて,正常肢芽に特異的に発現している遺伝子の単離を試みた.引き算された遺伝子の中からランダムに300個を選び,塩基配列を決定した.解析の結果,80%既知の遺伝子で,20%が未知の遺伝子であった.未知の遺伝子については,whole-mount in situ hybridization法により発現パターンを調べ,興味あるパターンを示したクローンについてさらに解析中である.

In this study, the molecular mechanism of organ formation in vertebrae animals, the understanding of molecular organs, the use of FGF10 organs, the formation of organs, and the formation of known organs in the same shape, the lower parts of the vertebrae were isolated from the same location, and the whole body of the FGF10 animals was like the whole body of the animal, which is known to be the same as that of the new rules. This is the first time that the organs of the FGF10 have been cut in service. Last year, we did a lot of work. Last year, we did a lot of work on the FGF10KO. We need to analyze the situation. (Sekine et al.,1999,Nature Genetics;Ohuchi et al.,2000,BBRC). In this study, the structure of tissue and organ is affected by the interaction between epithelium and epithelium. the degree of tissue and organ is different, and it is often observed. The location of the Fgf10 is clearly detected. The tissue sections are clearly marked and the tissue sections are processed using the tissue in situ hybridization. The results show that Fgf10 is responsible for the failure of the organization. The pituitary gland, the ear cell, the epithelium, the epithelium, the pituitary gland, the ear cell, the epithelium, the epithelium. The results showed that FGF10 was an exception, and the epithelium-to-epithelium interaction was not found in the epithelium. First of all, the Fgf10 extremities form a special field of information, the abdomen is affected by the extremities (Dasoku), and the FGF10 extremities form an initial factor (Ohuchi et al.,1997,Development). The organs of the extremities were formed and the organs were formed. Please tell me that the son of the FGF10 doctor, please tell me what to do. The normal limb buds can be detected by PCR, while the algorithm will be introduced by PCR. The normal limb buds will be isolated from the normal limb bud. In the calculation, there are 300 candidates in the database, and the base allocation column determines the number of candidates. The results of the analysis show that 80% of the known and 20% of the unknown children are affected. If you don't know if you don't know what's going on, the whole-mount in situ hybridization method shows that you don't know what's going on, and that you don't know what's going on.