脳・網膜の発生分化に関与するG蛋白質共役型受容体システムの機能解明

大脑和视网膜发育和分化中涉及的 G 蛋白偶联受体系统的功能阐明

• 批准号: 18022029
• 负责人: 大内 淑代
• 金额: $ 5.12万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18022029/
• 关键词: autotaxin; G蛋白質共役型受容体; GPCR; 発生分化; 脂質; 網膜; オプシン; 脳神経系; スフィンゴシン1リン酸; リゾホスファチジン酸

G蛋白質共役型受容体(GPCR)は動物ゲノムの中で最大の遺伝子ファミリーを構成し、神経伝達物質の受容体の多くがGPCRであること、現在使用されている薬剤の標的分子として最多であることなどから、成体脳におけるその機能について多くの知見が蓄積されている。本研究課題では,GPCRシグナル系の脳と網膜の発生分化における役割をニワトリ胚、マウス胚を用いて明らかにすることを目的とした。本年度は,脂質をリガンドとするGPCRシグナル,特に,リゾリン脂質(アシル基が1つで細胞膜間を移動しやすい性質をもつ)であるリゾホスファチジン酸(LPA)の合成酵素であるautotaxin(ATX)のニワトリ脳発生における役割について解析した。ニワトリ胚でのRNA干渉法は、長鎖2本鎖RNA導入法、短鎖RNA導入法、ヘアピンDNAベクター導入法などが報告されているが、我々はニワトリ胚で特に有効なDNAベクターを電気穿孔法により導入することで、脳や眼で効率よくRNA干渉をおこすことに成功した。その方法を用いて、ATXのニワトリ間脳形成における役割を調べたところ、ホメオ蛋白質であるPax6と関係のあることが明らかになった。並行して網膜GPCRであるオプシンに着目し、ニワトリ発生期網膜における非典型オプシン(視細胞オプシン以外のオプシン)遺伝子の発現様式について調べた。その結果、X型メラノプシン(Opn4x)以外にも、M型メラノプシン(Opn4m),VA opsin様分子が発生途上の視細胞以外の特定の網膜細胞、あるいは脳や神経管に発現すること、Opsin5が発生後期の大型神経節細胞およびGAD陽性アマクリン細胞の一部に発現することを明らかにした。視細胞オプシン(ロドプシン、錐体オプシン)遺伝子は、眼の病気や色覚多型に深く関係しており、非典型オプシン遺伝子も未知の眼の病気に関与しているかもしれない。

Type G protein is service by let body (GPCR) は animals ゲ ノ ム の で maximum の heritage 伝 son フ ァ ミ リ ー を し, god 経 の 伝 of material more than the capacity of body の く が GPCR で あ る こ と, now use さ れ て い る 薬 tonic の target molecules と し て most で あ る こ と な ど か ら, adult 脳 に お け る そ の function に つ い て more く の knowledge accumulation さ が Youdaoplaceholder0 れて る. This research topic で は, GPCR シ グ ナ ル is の 脳 と retinal の 発 raw differentiation に お け る service cut を ニ ワ ト リ embryo, マ ウ ス embryo を with い て Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. This year は lipid を リ ガ ン ド と す る GPCR シ グ ナ ル, に, リ ゾ リ ン lipid (ア シ ル base が 1 つ で を moving between the cell membrane し や す い nature を も つ) で あ る リ ゾ ホ ス フ ァ チ ジ ン acid (LPA) の synthetic enzyme で あ る autotaxin (ATX) の ニ ワ ト リ 脳 発 raw に お け る service cut に つ い て parsing し Youdaoplaceholder0. ニ ワ ト リ embryo で の RNA は dry involved method, 2 this long locks, lock RNA import, short RNA import lock, ヘ ア ピ ン DNA ベ ク タ ー import method な ど が report さ れ て い る が, I 々 は ニ ワ ト リ embryo で に had sharper な DNA ベ ク タ ー を 気 perforation method に よ り import す る こ と で, 脳 や eye で sharper rate よ く RNA dry involved を お こ す こ と に Success: た. そ の way を with い て, ATX の ニ ワ ト リ 脳 formed between に お け る "を cutting adjustable べ た と こ ろ, ホ メ オ protein で あ る Pax6 と masato is の あ る こ と が Ming ら か に な っ た. Parallel し て retinal GPCR で あ る オ プ シ ン に mesh し, ニ ワ ト リ 発 stage retinal に お け る atypical オ プ シ ン (depending on the cell オ プ シ ン outside の オ プ シ ン) posthumous son 伝 の 発 presently others type に つ い て adjustable べ た. Youdaoplaceholder0 そ result, except for type X メラノプシ <e:1> (Opn4x) に そ, type M メラノプシ <e:1> (Opn4m),VA Opsin others in molecular が 発 born on の way beyond specific の の retinal cells, あ る い は 脳 や god 経 tube に 発 now す る こ と, Opsin5 が 発 born late の big god 経 ganglion cells お よ び GAD positive ア マ ク リ ン cells の a に 発 now す る こ と を Ming ら か に し た. Visual cell オ プ シ ン (ロ ド プ シ ン, cone オ プ シ ン) heritage の 伝 は, eye disease 気 覚 や color polymorphism に deep く masato is し て お り, atypical オ プ シ ン heritage 伝 son も の eye の unknown disease 気 に masato and し て い る か も し れ な い.

项目成果

Cessation of Fgf10 signaling, resulting in a defective dental epithelial stem cell compartment, leads to the transition from crown to root formation

• DOI: 10.1242/dev.02307
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: DEVELOPMENT
• 影响因子: 4.6
• 作者: Yokohama-Tamaki, T;Ohshima, H;Harada, H
• 通讯作者: Harada, H

Functional analysis of Autotaxin, a phospholipids-generating enzyme, by in ovo RNAi and misexpression studies during chicken neural development.

通过鸡神经发育过程中的卵内 RNAi 和错误表达研究，对 Autotaxin（一种磷脂生成酶）进行功能分析。

• 发表时间: 2007
• 作者: Ohuchi;H.
• 通讯作者: H.

Introduction of silencing-inducing transgene against Fgf19 does not affect expression of Tbx5 and beta3-tubulin in the developing chicken retina.

引入针对 Fgf19 的沉默诱导转基因不会影响发育中鸡视网膜中 Tbx5 和 β3-微管蛋白的表达。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Dev. Growth Differ. 50
• 作者: Okamoto;M.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

ニワトリ網膜と神経組織におけるMelanopsin-like(cOpn4L)遺伝子およびVA opsin-like遺伝子の発現解析

鸡视网膜和神经组织中黑视蛋白样（cOpn4L）基因和VA视蛋白样基因的表达分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 高木晃;ら
• 通讯作者: ら

Diversified expression patterns of autotaxin, a gene for phospholipid-generating enzyme during mouse and chicken development

自分泌运动因子（一种小鼠​​和鸡发育过程中磷脂生成酶的基因）的多样化表达模式

• 发表时间: 2007
• 期刊: Dev. Dyn. 236
• 作者: Ohuchi H;Hayashibaza Y;Matsuda H;Onoi M;Mitsumori M;Tanaka M;Aoki J;Arai H;Noji S.
• 通讯作者: Noji S.