モルヒネ依存時のアデニル酸シクラーゼ遺伝子変化:μ受容体欠損マウスを用いた解析

吗啡依赖过程中腺苷酸环化酶的遗传变化：使用 μ 受体缺陷型小鼠进行分析

• 批准号: 10780485
• 负责人: 船田 正彦
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Daiichi University, College of Pharmaceutical Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10780485/
• 关键词: モルヒネ依存; アデニル酸シクラーゼ; μ受容体

本研究では、μ受容体ノックアウトマウス(MuKO)および親の系であるC57BL/6Nマウスを用い、モルヒネ依存形成に関与する脳内アデニル酸シクラーゼ・サブタイプを同定し、μ受容体の細胞内情報伝達における役割を解析した。行動解析では、モルヒネ(8-45mg/kg,s.c.)を1日2回5日間にわたって慢性投与し、ナロキソンを投与して行動観察を行った。ナロキソン誘発ジャンピング行動はC57BL/6Nマウスで15±2.5回の出現であったが、MuKOでは0回であり有意に抑制されていた。また、モルヒネ依存時のアデニル酸シクラーゼmRNAの変動について検討を行った。RNaseプロテクション・アッセイを利用して、大脳皮質、線条体、側坐核、中脳および小脳の5部位におけるアデニル酸シクラーゼtype I、II、VおよびVIIIの mRNAの定量を行った。その結果、モルヒネ慢性投与によってO57BL/6Nマウスの大脳皮質および側坐核においてtype IIおよびVのmRNA量の増加が認められた。一方、MuKOでは、有意な変化は認められなかった。これらの結果から、モルヒネ依存形成に、μ受容体を介したアデニル酸シクラーゼの機能変化が関与する可能性が示唆された。本年度は、モルヒネ慢性投与で変化が認められたアデニル酸シクラーゼtype IIおよびVのcDNAを発現べクターに組み込み、COS細胞に導入し、選択的μ受容体作動薬DAMGOのcAMP 減少効果に対するモルヒネ慢性処置の影響を検討した。その結果、typeIIおよびVともにDAMGOにより抑制され、モルヒネ慢性処置でその効果は減弱された。したがって、モルヒネ依存形成機構にμ受容体を介するアデ二ル酸シクラーゼ type IIおよびV抑制作用の機能変化が関与することが明らかになった。

In this study, we analyzed the relationship between the formation of C57BL/6N receptor and the intracellular information transmission of μ receptors. Action resolution (8-45mg/kg,s.c.) 1 day, 2 days, 5 days, 7 days, 7 days, 8 days, 10 days, 10 days, C57BL/6N The expression of mRNA is dependent on the growth of the cell. RNase mRNA was quantified in five sites: cortex, striae, lateral nucleus, middle nucleus, and small nucleus. As a result, the mRNA levels of type II and V in the large cortex and lateral nucleus of the mouse were increased. One side, Muko, intentional The results of this study show that the relationship between the formation and the function of the receptor is not obvious. This year, we will investigate the effects of chronic treatment on the development of recombinant DNA, COS cells, and the reduction of DAMGO cAMP. As a result, type II and V are suppressed, and the effects of chronic treatment are reduced. The function of type II and V inhibition is related to the formation of a dependent mechanism for the formation of μ-receptors.