权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

紫外共鳴ラマン分光法によるメリチンのトリプトファン側鎖の構造解析の研究

紫外共振拉曼光谱法分析蜂毒肽色氨酸侧链结构研究

基本信息

批准号：
11740307
负责人：
増田聡
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

メリチンはミツバチ毒の主成分であり、26残基のアミノ酸からなる塩基性ポリペプチドである。主たる生理活性は赤血球の破砕で、細胞膜を構成する脂質二重膜に作用するものと考えられている。その作用機序には"wedge mechanism"など幾つかのモデルが提唱されているが、膜に作用する際にペプチドがα-helixを構成していること以外の詳細については明らかにされていない。紫外共鳴ラマン分光法(UVRR)は、蛋白質・ポリペプチドの芳香属側鎖のコンフォメーションや周囲の環境を調べるのに有用な手段で、試料の状態に関係なく測定可能という利点を持つ。本研究ではメリチンのTrp-19残基に注目し、水溶液中や脂質二重膜中での同残基が置かれている環境について検討した。メリチンは溶血活性のほかに、大腸菌など各種細菌を破砕する抗菌活性も有するが、4残基をD-アミノ酸に置換したジアステレオマーを合成すると溶血活性を失い、抗菌活性のみが残ることが知られている。このことはメリチンの誘導体が殺菌剤として有用である可能性を示唆している。赤血球の細胞膜は中性脂質を主に含むのに対し、細菌の脂質は主に酸性脂質で構成されている。酸性脂質で構成された人工脂質二重膜にメリチンジアステレオマーを作用させると、Trpの共鳴ラマンバンド強度が増大したが、メリチンが酸性脂質膜に結合したときほどの増大ではなかった。前年度の研究から、このことはTrp-19側鎖が脂質膜内部に埋もれたことを示唆しており、メリチンではジアステレオマーより深く埋没していると考えられる。また、中性脂質膜に対して作用させても強度増大は起きず、親和性が低いことを示唆している。メリチンは脂質膜に結合するときにα-helixを形成することが知られているが、ジアステレオマーでは立体障害のために形成できない。このことが膜に対して作用するときの差異としてあらわれたと考えられる。

The main component of the toxin is 26 residues. The main physiological activity is the breakdown of red blood cells and the formation of lipid double membranes. The mechanism of action is "wedge mechanism", which is composed of α-helix and membrane. Ultraviolet resonance spectroscopy (UVRR) is a useful method for determining the relationship between protein and aromatic side locks, and environmental conditions. In this study, the Trp-19 residue in aqueous solution and lipid double membrane was investigated. The hemolytic activity of E. coli and the antibacterial activity of E. coli were determined by D-amino acid substitution. The possibility of the induction of this phenomenon can be explained by the fact that it is useful. The membrane of red blood cells is composed of neutral lipids and acidic lipids. The acidic lipid forms an artificial lipid membrane, and the resonance intensity of the membrane increases. Research from the previous year showed that Trp-19 was locked inside the lipid membrane, and the membrane was deeply buried. In addition, the neutral lipid membrane has a high affinity and a low affinity. The formation of α-helix in lipid membrane The difference between the two is that