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MRL/MpJ-lpr/lprマウスの病態と自己反応性T細胞に関する研究

MRL/MpJ-lpr/lpr小鼠病理及自身反应性T细胞研究

基本信息

批准号：
11770250
负责人：
藤井隆夫
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者らは平成11年度に,抗dsDNA抗体を産生しヒトSLE類似の病態を呈するMRL/Mp-Fas^<lpr>マウス(MRL/lprマウス)脾細胞から自己反応性T細胞(dna51)をクローン化することに成功した。そこで平成12年度は,このクコーンdna51をin vitroあるいはin vivoでcharacterizationし,MRL/lprマウスをもちいて細胞移入実験を行った。in vitroにおける検討で,dna51はCD3+CD4+CD8-B220-αβTCRを有し,抗CD3抗体による刺激でIFNγを産生(Th1),同種B細胞と混合培養することで抗dsDNA抗本の産生を刺激した。またdna51を移入することによりMRL/lprマウスの腎障害を増悪させた。なお腎障害は糸球体における細胞浸潤が著明で,ループス腎炎に酷似していた。さらにdna51を放射線照射(20Gy)により不活化した後MRL/lprマウスに移入することで,同マウスの血清中抗dsDNA抗体産生および糸球体における細胞浸潤が抑制された。この機序は現時点では明らかでないが,脾細胞の総数がコントロール群に比し著しく減少していることが確認されている。以上の結果は,EAE(experimental autoimmune encephalomyelitis)と同様MRL/lprマウスにおいても特定のT細胞が病態に深く関わっており,非活性化したT細胞のワクチン効果を示唆する。同時に,クローンdna51のT細胞レセプター(TCR)はVβ8.3を有し,RT-PCRおよび特異的プライマーをもちいてTCRβ鎖のシークエンスを行ったところ,他のループスモデルマウス(SNFlなど)における既報告とは異なる配列を有していた。一方で,そのCDR3部位には陰性荷電したなアミノ酸(アスパラギン酸あるいはグルタミン酸)を含み,クロマチンを認識できる可能性も示唆された。このアミノ酸配列はきわめて興味深く、今後この部分のぺプチドを合成し,治療に用いることができないか検討中である。

Applicants successfully developed anti-dsDNA antibodies in SLE-like pathologies in the first 11 years of the year, including MRL/Mp-Fas <lpr>(MRL/lpr) splenocytes and self-reactive T cells (DNA51). In 2012, the DNA51 in vitro was transformed into a cell in vivo. In vitro studies,DNA51 stimulated IFNγ production by CD3 + CD4 + CD8-B220-αβTCR, anti-CD3 antibody (Th1), and anti-dsDNA antibody production by mixed culture of B cells of the same species. DNA51 is the most important factor affecting the kidney function. The kidney damage is similar to that of glomerulonephritis. After radiation irradiation (20Gy) of DNA51, MRL/lpr was inactivated, and the production of anti-dsDNA antibodies in serum was inhibited. The mechanism is now clear, and the total number of splenocytes is reduced. These results indicate that EAE(experimental autoimmune encephalomyelitis) and MRL/lpr are closely related to specific T cell pathologies and inactive T cell pathologies. At the same time, the TCR of CRDNA51 has Vβ8.3,RT-PCR has special characteristics, and its TCRβ lock has special characteristics. On the other hand, the CDR3 site is negatively charged and the possibility of recognition is indicated. This is the first time that we've seen this.