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AAVベクターによる神経細胞へのドーパミン合成関連酵素の多重遺伝子導入の長期効果-導入遺伝子の長期発現とドーパミンによる細胞毒性についての検討-

使用 AAV 载体将多巴胺合成相关酶的多个基因转移到神经元中的长期效果 - 检查导入基因的长期表达和多巴胺诱导的细胞毒性 -

基本信息

批准号：
11770333
负责人：
静間奈美
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

パーキンソン病に対する遺伝子治療法を開発するため、神経細胞へ安全かつ効率良く遺伝子導入できるアデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターを用いた研究を進めた。ドーパミン合成に必要な三種類の酵素、即ち、L-ドーパ合成を触媒するチロシン水酸化酵素(TH)、L-ドーパからドーパミンへの変換に必要な芳香族アミノ酸脱炭酸酵素(AADC)、及びテトラヒドロビオプテリン(THの補酵素)合成の律速酵素であるGTPシクロヒドロラーゼI(GCH)の各遺伝子を搭載したAAVベクター(AAV-TH、AAV-AADC及びAAV-GCH)を作製し、パーキンソン病のモデル動物の線条体に注入する実験を行った。前年度より検討を継続しているモデルラット(黒質線条体路を6-hydroxydopamineで破壊して作製)を用いた実験では、導入遺伝子の線条体における発現は18ヶ月後にも認められ、apomorphine投与後の異常回転運動に対する治療効果も持続していることを確認した。今年度はさらに、MPTPを慢性投与して薬剤性パーキンソニズムを発症させたモデルサルに上記の三種類のAAVベクターを片側の被殻に注入しその効果を検討した。運動機能の評価では対側の上下肢の運動障害の改善効果が認められた。被殻のドーパミン受容体過敏性をapomorphine投与によって検討したところ体幹の回転するような姿勢が認められ、ベクター注入側におけるドーパミン受容体過敏性の改善効果と考えられた。ベクター注入5週間後に行った免疫組織化学的検討では被殻の広い範囲で各遺伝子の発現が確認された。以上より、AAVベクターを応用して線条体内でドーパミンを直接合成させる遺伝子治療は、パーキンソン病の新しい治療法として期待される。

The development of gene therapy in the treatment of diseases and diseases, the safety of nerve cells, the efficiency of gene introduction, the development of gene therapy in the treatment of diseases and diseases, and the development of gene therapy in the treatment of diseases and diseases Three types of enzymes are essential for the synthesis of enzymes, i.e., enzymes for hydration (TH), enzymes for conversion (AADC), enzymes for the synthesis of enzymes.(AAV-TH, AAV-AADC, and AAV-GCH) are controlled and injected into animal lines. In the past year, the treatment effect of apomorphine on abnormal return movement was confirmed after 18 months of treatment. This year, MPTP is a chronic injection of the three types of AAV into the shell of the film. The evaluation of motor function and the improvement of motor impairment of upper and lower limbs on opposite sides are recognized. The results of apomorphine injection on the receptor allergy of the shell and the improvement of the receptor allergy on the injection side are as follows: Immunohistochemical examination 5 weeks after injection confirmed the development of each protein in the shell. The above AAVs can be used in vivo to directly synthesize the gene therapy, and the new treatment method for the disease can be expected.