アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターの開発とその癌遺伝子治療への応用

腺相关病毒（AAV）载体的开发及其在癌症基因治疗中的应用

• 批准号: 15025268
• 负责人: 小澤 敬也
• 金额: $ 12.86万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025268/
• 关键词: がん遺伝子治療; AAVベクター; 組織特異性; バキュロウイルス; 卵巣癌; 可溶型Flt-1; IL-10; NK4

アデノ随伴ウイルス(AAV : adeno-associated virus)ベクターは、安全性が高く、骨格筋などの非分裂細胞へ遺伝子導入可能で、そのような細胞では長期的な遺伝子発現が期待できる。そこで、抗腫瘍血管療法や癌の転移・播種の抑制を狙った治療法への応用が期待され、本研究では以下の研究を行った。1)AAVベクターの血清型と組織特異性に関する検討:AAV-1,2,5,7,8型AAVに由来するカプシドを持った各AAVベクター作製法を確立し、骨格筋に対しては1型及び7型由来のベクターが、また、門脈内投与においては8型由来のベクターが最大の効果を示した。各血清型のキャプシド蛋白質に対する免疫反応をELISA法で調べたところ、全てのマウスにおいてベクター投与後に抗体価の有意な上昇が確認できた。2)バキュロウイルスを利用したAAVベクター作製法の開発:AAVベクターの普及を阻んできたベクター作製技術の壁を打開するため、バキュロウイルスと昆虫細胞を利用したAAVベクター大量作製システムの開発を1,2,5型について行った。本法で作製したAAVベクターは、通常法によるものと機能的に差異がないことが判明した。3)AAVベクターを用いた癌に対する遺伝子治療ストラテジーの検討:応用研究では、卵巣癌の腹膜播種と癌性腹水の制御を目的に、可溶型Flt-1、IL-10の各遺伝子を搭載したAAVベクターを作製し、担癌ヌードマウスを用いて治療モデル実験を引き続き実施し、それぞれの治療用遺伝子の有効性を明らかにした。4)脂肪組織への遺伝子導入法:1型AAVベクターにプルロニック系界面活性剤を添加することで、脂肪組織への遺伝子導入効果を改善することができた。また、遺伝子導入を行った組織を完全に摘出することで、元の状態に戻すことができた。

ア デ ノ with accompanying ウ イ ル ス (AAV: adeno - associated virus get) ベ ク タ ー は, high security が く, skeletal muscle な ど の not splinter cell へ heritage 伝 import may で, そ の よ う な cells で は な of long-term 伝 son 発 が now expect で き る. そ こ で, swollen sores の や carcinoma vascular therapy planning move, sowing の inhibit を previously っ た therapy へ の 応 with が expect さ れ, this study で は following の を line っ た. 1) AAV ベ ク タ ー の serotype と tissue specificity に masato す る beg: 検 AAV - 1 type,2,5,7,8 AAV に origin す る カ プ シ ド を hold っ た the AAV ベ ク タ を ー as know-how for establishing し, skeletal muscle に し seaborne て は type 1 and type び 7 origin の ベ ク タ ー が, ま た, portal in cast and に お い て は 8 origin の ベ ク タ ー が is the largest The result を shows that た. Each serotype の キ ャ プ シ ド protein に す seaborne る immune against 応 を ELISA method で adjustable べ た と こ ろ, whole て の マ ウ ス に お い て ベ ク タ ー に antibodies after he and 価 の intentionally な rise が confirm で き た. 2) バ キ ュ ロ ウ イ ル ス を using し た AAV ベ ク タ ー method for の open 発 : AAV ベ ク タ ー の popularization を resistance ん で き た ベ ク タ ー cropping technology の wall open を す る た め, バ キ ュ ロ ウ イ ル ス と insect cell を using し た AAV ベ ク タ ー large system シ ス テ ム の open 発 を type 1,2,5 に つ い て line っ た. This law で cropping し た AAV ベ ク タ ー は, usually に よ る も の と に difference function が な い こ と が.at し た. 3) AAV ベ ク タ ー を with い た carcinoma に す seaborne る heritage 伝 son treatment ス ト ラ テ ジ ー の beg: 検 応 with research で は, egg 巣 carcinoma の peritoneal seeding と cancerous ascites の suppression を purpose に, soluble Flt 1 and IL - 10 の heritage 伝 son を carry し た AAV ベ ク タ ー を as し, bear carcinoma ヌ ー ド マ ウ ス を with い て treatment モ デ ル be 験 を lead き 続 The therapeutic effects of 伝 seeds are を, ら, に, た and た. 4) adipose tissue へ の posthumous son 伝 import method: type 1 AAV ベ ク タ ー に プ ル ロ ニ ッ ク system interface active tonic を add す る こ と で, adipose tissue へ の heritage 伝 son import services fruit を improve す る こ と が で き た. Line ま た, but 伝 import を っ た organization を に completely pick out す る こ と で, yuan の state に 戻 す こ と が で き た.

项目成果

Ideno, J.: "Persistent phenotypic correction of central diabetes insipidus using adeno-associated virus vector-expressing arginine-vasopressin in brattleboro rats."Mol.Ther.. 8. 895-902 (2003)

Iden, J.：“在布拉特尔伯勒大鼠中使用表达精氨酸加压素的腺相关病毒载体对中枢性尿崩症进行持续表型校正。”Mol.Ther.. 8. 895-902 (2003)

The Adenovirus E1A and E1B19K genes provide a helper function for transfection-based AAV vector production.

腺病毒 E1A 和 E1B19K 基因为基于转染的 AAV 载体生产提供辅助功能。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Gen.Virol. 85
• 作者: Matsushita T.;et al.
• 通讯作者: et al.

Topoisomerase inhibitors enhance the cytocidal effect of AAV-HSVtk/ganciclovir on head and neck cancer cells.

拓扑异构酶抑制剂增强 AAV-HSVtk/更昔洛韦对头颈癌细胞的杀细胞作用。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Int J Oncol 25
• 作者: Kanazawa T;et al.
• 通讯作者: et al.

Kametaka, M: "Reduction of CTLL-2 cytotoxicity by induction of apoptosis with a Fas-estrogen receptor chimera"Cancer Sci.. 94. 639-643 (2003)

Kametaka, M：“通过使用 Fas-雌激素受体嵌合体诱导细胞凋亡来降低 CTLL-2 细胞毒性”Cancer Sci.. 94. 639-643 (2003)

Roles of Bim in apoptosis of normal and Bcr-Abl-expressing hematopoietic progenitors

• DOI: 10.1128/mcb.24.14.6172-6183.2004
• 发表时间: 2004-07-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Kuribara, R;Honda, H;Inaba, T
• 通讯作者: Inaba, T