細胞接着障害及びシグナル伝達系阻害による大腸癌転移抑制に関する研究

细胞粘附紊乱及信号转导系统抑制抑制结直肠癌转移的研究

基本信息

批准号：
11770720
负责人：
斎藤登
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究においては転移メカニズムの抑制をはかるため、大腸癌肝転移を動物実験モデルで再現し、細胞接着阻害およびシグナル伝達阻害による転移抑制の可能性を検討すべく研究遂行した。[細胞接着阻害]ラット自然転移モデル(肝・肺転移)は、ラット由来大腸癌細胞を用いて肝-肺指向性細胞株の継代〜移植繰り返し樹立した。細胞接着阻害はfibronectin tryptic digestよりgelatin affinity column chromatography法にて単離・精製したfibronectin fragment(75kDa)を用いて検討した。In vitroにおいてはtype IV collagenを基質としたプレート上で癌細胞との接着阻害を実験し、濃度依存的に抑制結果を示した(max40%抑制)。In vivoにおいては転移モデル上で癌細胞注入と同日にfibronectin fragmentも投与し、100μg/mlでmax50%の抑制を示した。Lamininのcell binding domainを低温操作下に精製進める工夫したが、単一施設では設備的に限界で今後の継続課題となった。[シグナル伝達系阻害]2種類のNDPキナーゼ/nm23アイソフォーム(18kDa)は細胞内局在が異なり、GTP結合蛋白質を介する転移のシグナル伝達系に重要な因子であるため、当初はそのアイソフォームに特異的アミノ酸配列を持つペプチドを検索したが、有意なものが見つからずシグナル伝達系のなかでも細胞増殖因子EGFR阻害作用をもつZD1839(4-(3-Chloro-4-fluorophenyl amino)-7-methoxy-6-(3-(4-morpholinyl)propoxy)quinazolineを用いた実験系の開始に到り、研究年限を迎えた。今後の展開は細胞接着阻害と血管新生阻害剤との併用で確認された効果に匹敵、ないし上回る抑制率が期待される。

在这项研究中，为了抑制转移机制，我们在动物实验模型中再现了肝转移，并进行了研究，以检查通过抑制细胞粘附和信号传导抑制转移的可能性。 [细胞粘附抑制]使用大鼠自发转移模型（肝/肺转移）是通过使用大鼠衍生的结肠癌细胞通过和移植和移植肝肺热带细胞系反复建立的。使用纤连蛋白片段（75 kDa）研究了细胞粘附抑制，并通过纤连蛋白甲状腺色质消化物从明胶亲和力柱色谱法分离并纯化。在体外，使用IV型胶原蛋白作为底物在板上实验对癌细胞粘附的抑制作用，并以浓度依赖性方式显示了抑制作用（最大抑制）。在体内，在转移性模型中，还在癌细胞注射的同一天给予纤连蛋白片段，并在100μg/ml时显示出最大抑制50％。尽管层粘连蛋白的细胞结合结构域在低温操作下进行了完善，但该设施在单个设施中受到限制，这成为未来的持续问题。 [信号系统抑制]两种类型的NDP激酶/NM23同工型（18KDA）具有不同的亚细胞定位，并且是GTP结合蛋白介导的转移的信号系统中的重要因素，因此最初搜索了具有特定氨基酸序列的肽序列，但没有一个具有重要作用的氨基酸序列，但它们的生长却没有一个细胞。使用氨基的研究期已经达到了实验系统的开始）-7-甲氧基-6-（3-（4-酚烯基）丙氧基）喹唑啉。与细胞粘附抑制和血管生成抑制剂的确认作用相比，未来的发展有望具有可比或优质的抑制作用。