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象牙芽細胞の痛覚受容器としての可能性に関する研究(イオンチャネルレベルでの検索)

成牙本质细胞作为疼痛受体的潜力研究（离子通道水平搜索）

基本信息

批准号：
11771186
负责人：
内田憲二
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度、ラットの切歯を細切することにより取り出した象牙芽細胞をパッチクランプ法にて膜電位の変化およびイオンチャンネルを調べ、象牙芽細胞の痛覚受容器としての可能性を調べてきた.また、継代培養された歯髄細胞においてパッチクランプ法を用い、すでに3種類の細胞応答パターンを得ている.今回、これら両者の結果を考慮し、培養歯髄細胞の象牙芽細胞または前象牙芽細胞への分化と痛覚受容器としての可能性との関連を形態学的、電気生理学的手法によって検討した.実験には、生後2〜3週間のWistar系ラットの切歯を用いた.抜歯後歯牙より歯髄を取り出し、細胞培養を行った.実験には初代歯髄培養細胞を用いた.次に細胞のアルカリフォスファターゼ活性を調べた.細胞は強い染色性と弱い染色性を持つ2種類が得られた.形態的には、紡錘形とアメーパー状の2種類の細胞が得られた.これらにパッチクランプ法を行い形態およびアルカリフォスファターゼ活性とイオンチャンネルとの関係について調べた.パッチ電極で細胞をホールセル状態にした後、細胞表面にK^+チャネル阻害剤であるBa溶液(10mM)で灌流し細胞を刺激したとき、3種類の細胞パターンが得られた.第1はBa^<2+>によって漏洩電流が増強されるタイプ、第2は外向き電流がBa^<2+>によって抑制されるタイプ、第3は0mV付近にピークを持つ内向き電流が発生するタイプの3種類であった.これらの結果は、歯髄から2〜6代継代した培養細胞の結果と類似していた.形態的またはアルカリフォスファターゼ活性とこれら細胞応答パターンの間には明確な差異は見られなかった.今回の所見は、用いた細胞が初代培養細胞であったことから他の細胞の混入や細胞周期のステージなどによる影響が考えられた.

In the past year, the cutting process of ivory bud cells has been carefully cut, and the possibility of membrane potential transformation and membrane potential generation of ivory bud cells has been modulated. In addition, the culture medium of three kinds of cell culture medium was established. In this paper, the results of these studies were considered, and the possibility of differentiation of cultured ivory bud cells and pre-ivory bud cells and receptor receptors was discussed. During the first 2 to 3 weeks of life, the Wistar system was used for cutting teeth. After the teeth were removed, the cells were cultured. The first generation of cultured cells was used. The second part of the article is about the regulation of cell activity. The cells are strongly stained and weakly stained. There are two kinds of cells. The morphology of the two types of cells is different. This is the first time that a person has been involved in a relationship with another person. The cells were stimulated by Ba solution (10mM) and then perfused with three kinds of K^++ cell inhibitors on the cell surface. The first Ba^<2+> leakage current increases, the second outward leakage current decreases, the third inward leakage current decreases, and the third inward leakage current increases. The results were similar in the second to sixth passages of cultured cells. The difference between the morphology and the activity of the cell is clear. The results showed that the cell cycle of the primary culture was influenced by the cell cycle.