ストレスによるプロテアソーム核内蓄積の機序解析

应激诱导蛋白酶体核积累的机制分析

• 批准号: 11771424
• 负责人: 冨田 章弘
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771424/
• 关键词: プロテアソーム; 核内蓄積; 低酸素; グルコース飢餓; ストレス

ストレス環境下で誘導されるプロテアソームの核内蓄積の機序を解明するため、今年度は、サブユニットに存在する核移行シグナル(NLS)の役割について焦点を当て研究し、以下の成果を得た。1)プロテアソームのサブユニットの一つであるXAPC7のNLSに着目し、野生型(XAPC7-WT)及びNLSを欠失させた変異型XAPC7(XAPC7-dNLS)の発現ベクターを作製した。これらをヒト大腸がんHT-29細胞にトランスフェクションし、XAPC7-WT、XAPC7-dNLSを安定に発現する細胞を樹立した。2)導入したXAPC7-WT、XAPC7-dNLSは、免疫沈降法によって20Sプロテアソームに取り込まれていることが確認された。3)XAPC7-WT導入細胞では、非導入細胞と同様に、グルコース飢餓環境下でプロテアソームの核蓄積が誘導され、核内のプロテアソーム活性は約3.5倍に上昇した。一方XAPC7-dNLS導入細胞では、活性上昇は約2.3倍にとどまり、ストレスによる核蓄積が減弱していた。以上の結果より、ストレス環境下でのプロテアソームの核蓄積において、XAPC7のNLSが重要な働きをすることが明らかになった。XAPC7以外にもNLSを持つサブユニットが3つ知られており、こうしたサブユニットのNLSについても今後検討していきたい。

The mechanism of nuclear accumulation induced by nuclear migration in the environment was elucidated. This year, the nuclear migration mechanism (NLS) was focused on and the following results were obtained. 1) XAPC7 and NLS were found in the wild type (XAPC7-WT) and wild type (XAPC7-dNLS). This is the first time that HT-29 cells, XAPC7-WT and XAPC7-dNLS have been successfully established. 2)XAPC7-WT and XAPC7-dNLS were introduced and confirmed by immunoprecipitation. 3) Nuclear accumulation induction and nuclear activity of XAPC7-WT transfected cells and non-transfected cells increased by about 3.5-fold under starvation. The activity of XAPC7-dNLS was increased by about 2.3 times, and the nuclear accumulation was decreased. As a result of the above, the nuclear accumulation of XAPC7 in the environment is very important. XAPC7 outside the NLS to hold the

项目成果

Kim,H.D.: "Glucose-regulated stresses cause degradation of DNA topoisomoross Iiα by inducing nuclear proteasome during G,cell cycle arrest in"J.Cell.Physiol.. 180. 97-104 (1999)

Kim, H.D.：“葡萄糖调节的应激通过在 G 细胞周期停滞期间诱导核蛋白酶体导致 DNA 拓扑异构体 Iiα 的降解”J.Cell.Physiol.. 180. 97-104 (1999)

Tomida,A: "Drug resistance mediated by allular stress response to micro environment of solid tumor."Anti-Cancer Drug Design. 14. 169-177 (1999)

Tomida，A：“实体瘤微环境的全细胞应激反应介导的耐药性。”抗癌药物设计。

Ogiso,Y.: "Glucose staruation and hypoxia induce muclear accumulation of proteasome in cancer cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 258. 448-452 (1999)

Ogiso,Y.：“葡萄糖饥饿和缺氧诱导癌细胞中蛋白酶体的细胞核积聚。”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 258. 448-452 (1999)

冨田章弘: "プロテアソーム"最新医学. 56巻・3号. 398-403 (2001)

富田昭宏：《蛋白酶体》最新医学，第 56 卷，第 3 期。398-403 (2001)

Ogiso,Y. et al: "Proteasome inhibition circumvents solid tumor resistance to topoisomerase II-directed drugs."Cancer Res.. 60. 2429-2434 (2000)

小木曾，Y.