グリコサミノグリカン鎖生合成に関わるグルクロン酸転移酵素遺伝子の構造と発現機構

糖胺聚糖链生物合成中葡萄糖醛酸基转移酶基因的结构和表达机制

• 批准号: 11771460
• 负责人: 北川 裕之
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kobe Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771460/
• 关键词: グリコサミノグリカン; コンドロイチン硫酸; グルクロン酸; 糖転移酵素; 遺伝子構造; プロテログリカン; ヘパラン硫酸; 遺伝子発現

硫酸化グリコサミノグリカンは共通の糖-タンパク質結合領域を介してコアタンパク質に共有結合し、ほとんど全ての細胞表面や細胞外マトリックスに存在している。我々がクローニングしたグルクロン酸転移酵素Iは、この共通の糖-タンパク質結合領域の生合成に関与するものであるため、この酵素の発現がコンドロイチン硫酸やペハラン硫酸などすべてのグリコサミノグリカンの生合成を制御している可能性が考えられた。そこで本年度は、マウスのグルクロン酸転移酵素Iのプロモーター領域を含む遺伝子構造を明らかにし、さらに組織での発現部位や時期などを解析することによりグリコサミノグリカンの生合成及び発現制御メカニズムの解明を試みた。我々は、グリコサミノグリカン生合成に関与するグルクロン酸転移酵素I(GlcAT-I)のcDNAクローンをヒト胎盤より得ているので、これを用いてヒト組織でのGlcAT-ImRNAの発現を調べた。また、入手困難なヒト組織が存在することと、生体内でのグリコサミノグリカンの機能を知るためのGlcAT-I遺伝子のノックアウトマウス作製を長期的目標として、ヒトGlcAT-IのcDNAの塩基配列を用いてEST(Expressed Sequence Tags)データーベースを検索し、マウスGlcAT-IのcDNAをクローニングし、マウス組織でのGlcAT-ImRNAの発現をNorthern blottingやIn situ hybridization法を用いて調べた。そして、マウスGlcAT-IのcDNAをプローブとして、マウス129SVJ遺伝子ライブラリーをスクリーニングすることにより、マウスGlcAT-Iの遺伝子を単離し、その構造を明らかにした。

There is a common sugar in the sulfated and whole cell surface of the cell, and there is a common sugar on the cell surface of the cell. In this paper, we study the possibility of biosynthesis in the field of biosynthesis in the field of biosynthesis of sulfuric acid. In the current year, there are significant changes in the field of transaminase in the field of environmental protection, such as the production of real-time data, the analysis of real-time data analysis, the synthesis of real-time data, and the implementation of the system. We do not know how to synthesize and synthesize the enzyme I (GlcAT-I) cDNA acid transferase I (acid transferase), and the tissue tissue GlcAT-ImRNA is sensitive to the growth of the fetal tissue. There is a significant increase in the number of health problems in the tissue. In vivo, it is possible to know that the GlcAT-I system is responsible for long-term monitoring, that the EST (Expressed Sequence Tags) information system is used in the EST (Expressed Sequence Tags) system, and that the GlcAT-I information system is used in the system. The organization uses the Northern blotting In situ hybridization method to verify that the GlcAT-ImRNA method is effective. Please tell me that you are not aware of the situation, that is, the GlcAT-I, the cDNA, the child, the 129SVJ, the GlcAT-I, the child, the child.

项目成果

刀禰 裕子 他: "Characterization of recombinant human glicuronyltransferase I involved in the biosynthesis of the glycosaminoglycan-protein linkage region of proteoglycans"FEBS Letters. 459・3. 415-420 (1999)

Yuko Tone 等人：“参与蛋白聚糖糖胺聚糖-蛋白质连接区域生物合成的重组人葡萄糖醛酸转移酶 I 的表征”FEBS Letters 459·3 (1999)。

北川裕之 他: "Molecular Cloning and Expression of a Novel Chondroitin 6-0-sulfotransferase"The Journal of Biological Chemistry. 275・28. 21075-21080 (2000)

Hiroyuki Kitakawa等：“新型软骨素6-0-磺基转移酶的分子克隆和表达”生物化学杂志275・28（2000）。