分裂酵母の減数分裂制御因子Mei2タンパク質の機能解析

本研究では、分裂酵母の減数分裂過程の開始と進行の鍵を握るRNA結合タンパク質Mei2の機能解明を目指している。分裂酵母細胞が減数分裂を行う条件がととのうと、Mei2は脱リン酸により活性化する。活性型Mei2は減数分裂前DNA合成を誘導した後、減数第一分裂時にも必須の機能を持つことが示されている。Mei2は減数分裂の進行にともなって核内の一点にドット状に局在する。Mei2の核内ドット形成において、Mei2と結合することが示されているmeiRNAという特異的RNA分子が重要な働きをしていることが我々の解析で明らかとなった。さらに、Mei2は単に細胞質から核へ移行してるだけではなく、細胞質-核間をシャトルして機能していることが明らかとなった。本年度の研究により、meiRNAはMei2の核移行の促進、核外排出の阻害ではなく、核内でのドット形成自体を制御する因子であることが示された。これまでの解析により、Mei2はmeiRNA以外のなんらかのRNAと相互作用することが、その機能に必須であると考えられている。そこで、減数分裂期の分裂酵母からMei2を免疫沈降して、共沈してくるRNAの単離を試みた。また、大腸菌で発現したMei2と分裂酵母の減数分裂期RNAを混合し、Mei2-標的RNA複合体を精製して、Mei2と特異的に結合するRNAの同定を行った。その結果、Mei2標的RNAの候補を複数単離した。in vivoとin vitroの二つのスクリーニング系で同一のRNAも得られており、それら候補RNAのMei2との結合を検討中である。

本研究では、分裂酵母の減数分裂過程の開始と進行の鍵を握るRNA結合タンパク質Mei2の機能解明を目指している。分裂酵母細胞が減数分裂を行う条件がととのうと、Mei2は脱リン酸により活性化する。活性型Mei2は減数分裂前DNA合成を誘導した後、減数第一分裂時にも必須の機能を持つことが示されている。Mei2は減数分裂の進行にともなって核内の一点にドット状に局在する。Mei2の核内ドット形成において、Mei2と結合することが示されているmeiRNAという特異的RNA分子が重要な働きをしていることが我々の解析で明らかとなった。さらに、Mei2は単に細胞質から核へ移行してるだけではなく、細胞質-核間をシャトルして機能していることが明らかとなった。本年度の研究により、meiRNAはMei2の核移行の促進、核外排出の阻害ではなく、核内でのドット形成自体を制御する因子であることが示された。これまでの解析により、Mei2はmeiRNA以外のなんらかのRNAと相互作用することが、その機能に必須であると考えられている。そこで、減数分裂期の分裂酵母からMei2を免疫沈降して、共沈してくるRNAの単離を試みた。また、大腸菌で発現したMei2と分裂酵母の減数分裂期RNAを混合し、Mei2-標的RNA複合体を精製して、Mei2と特異的に結合するRNAの同定を行った。その結果、Mei2標的RNAの候補を複数単離した。in vivoとin vitroの二つのスクリーニング系で同一のRNAも得られており、それら候補RNAのMei2との結合を検討中である。