ホヤの芽体発生を制御する遺伝子の機能解析

海鞘发育控制基因的功能分析

• 批准号: 11780535
• 负责人: 藤原 滋樹
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kochi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780535/
• 关键词: ホヤ; 出芽; 分化転換; 細胞増殖; レチノイン酸; RAR; RXR; プロテアーゼ

本研究では、出芽ホヤの芽体において様々な組織が成体体細胞の分化転換によって生じること、レチノイン酸が分化転換を誘導する内在因子であることを明らかにしてきた。初年度(11年度)はホヤから単離されたレチノイン酸受容本(RARとRXR)がレチノイン酸依存的な転写調節因子として機能すること、レチノイン酸によって発現が誘導されるプロテアーゼ(TRAMP)に細胞増殖活性があることを明らかにした。今年度(12年度)には以下のことを明らかにした。1.TRAMPの活性活性部位に変異を導入し酵素活性をなくした(プロテアーゼドメインのみからなる)タンパクが増殖促進活性を持つ、つまり細胞増殖誘導がプロテアーゼ活性とは別の機能によることがわかった。2.TRAMP N末側のタンパク間相互作用に関与するドメインを1つあるいは2つ含むリコンビナントタンパクを調製し、ウェストウェスタン法によって結合タンパクを探索した。2ndスクリーニングまで進んだが、まだクローンは得られていない。3.TRAMPリコンビナントタンパクを免疫原として抗体を調製した。TRAMP mRNAの間充織細胞における発現はレチノイン酸によって誘導されることがわかっている。レチノイン酸処理した間充織細胞の上清にTRAMPタンパクが分泌されるかどうか、抗体を用いて確認を試みた。4.胚発生におけるRAR/RXRの機能と役割を解析するためにカタユウレイボヤからRARとRXRのcDNA断片を単離した。一方、藤原らの別の研究で解析中のESTデータの中にRAR cDNAの配列を発見した。RAR、RXRの胚における発現を解析し、レポーターアッセイなどによって機能を解析する予定である。

In this study, budding and budding tissues were used to induce differentiation of adult somatic cells. In the first year (Y11), RAR and RXR were used to induce cell proliferation activity by regulating the function of RAR and RXR. This year (12 years), the following is the first time. 1. The activity of TRAMP is different from that of other enzymes. The activity of TRAMP is different from that of other enzymes. 2. TRAMP N terminal side of the interaction between the two sides of the relationship between the two sides of the two sides of the two The 2nd edition of the book was published in 1989. 3. TRAMP is the most important factor in immune response. TRAMP mRNA is expressed in mesenchymal cells and induced by acid. The supernatant of mesenchymal cells treated with acid was secreted by TRAMP, and the antibody was used to confirm it. 4. RAR and RXR cDNA fragments are isolated from the genome. A study on the identification of RAR cDNA in the analysis of EST data has been carried out. RAR, RXR's appearance analysis, classification analysis

项目成果

Fujiwara,S.: "Molecular bases of bud development in ascidians"The Biology of Ascidians. (印刷中). (2001)

Fujiwara, S.：“海鞘芽发育的分子基础”海鞘生物学（出版中）。

Kamimura,M.: "Functional retinoid receptors in budding ascidians."Development,Growth & Differentiation. 42(1). 1-8 (2000)

Kamimura,M.：“出芽海鞘中的功能性视黄醇受体。”发育、生长

Kawamura,K.: "Advantage or disadvantage : Is asexual reproduction beneficial to survival of the tunicate, Polyandrocarpa misakiensis?"Zoological Science. 17. 281-291 (2000)

Kawamura,K.：“优点还是缺点：无性繁殖对被囊类动物 Polyandrocarpa missakiensis 的生存有益吗？”动物学。

川村和夫: "ホヤの無性生殖とプロテアーゼ-細胞増殖・脱分化におけるTRAMPの役割-"生化学. 72・4. 298-302 (2000)

Kazuo Kawamura：“海鞘中的无性繁殖和蛋白酶 - TRAMP 在细胞增殖和去分化中的作用”生物化学 72・4（2000）。

Ohashi M.: "A retinoic acid-inducible modular protease in budding ascidians."Dvelopmental Biology. 214. 38-45 (1999)

Ohashi M.：“海鞘中的视黄酸诱导型模块化蛋白酶。”发育生物学。