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出芽ホヤの形態調節におけるレチノイン酸の役割

视黄酸在海鞘出芽形态调控中的作用

基本信息

批准号：
08254213
负责人：
藤原滋樹
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

出芽ホヤの無性生殖(出芽)においては、芽体の多くの組織が分化多能性の因鰓腔上皮の分化転換によって生じる。レチノイン酸はこの分化転換を誘導する内在因子である。本研究では1.レチノイン酸生成酵素の候補であるアルデヒド脱水素酵素(ALDH)のcDNAをRT-PCR法により単離した。ALDHファミリーに属する多数の遺伝子のcDNAが単離されたが、このうち2種類の遺伝子のmRNAが芽体において時期特異的な発現をしており、これらの遺伝子の産物が芽体の発生に関与することが示唆された。2.レチノイン酸レセプター(RARとRXR)のcDNAを単離した。無脊椎動物からのRARの単離はこれが最初なので、ライブラリーから単離したRARcDNAの予想アミノ酸配列と他の核内レセプターの配列を比較して分子系統樹を作成した。ホヤRARは脊椎動物のRARとクラスターを作ったが、脊椎動物のα、β、γのどのサブタイプともクラスターを作らなかった。このことから、RARのサブタイプは脊椎動物とホヤの分岐の後で起こったことが示唆された。ホヤRARのmRNAは芽体において発現すること、またレチノイン酸によって誘導されることがわかった。3.ディファレンシャルディスプレイ法により、レチノイン酸によって発現が誘導される遺伝子のcDNAを単離した。得られたcDNAの一つはトリプシンファミリーに属するセリンプロテアーゼをコードしていた。ホヤの細胞をレチノイン酸で処理するとトリプシンをはじめとする数種類のプロテアーゼが上清中に分泌されること、トリプシンは囲鰓腔上皮の脱分化を誘導することから、このcDNAがコードするタンパク質が、レチノイン酸の下流で芽体の組織分化に直接関与する機能分子である可能性が示唆された。

The budding of asexual reproduction (budding) is characterized by differentiation and pluripotency of multiple tissues of budding, and differentiation and transformation of gill epithelium. The differentiation and transformation of the enzyme are induced by endogenous factors. In this study, the cDNA of ALDH was isolated by RT-PCR. The cDNA of most of the ALDH genes in this genus is isolated and expressed in two different stages of bud development. The mRNA of these genes is expressed in different stages of bud development. 2. The cDNA of RAR and RXR is isolated. Invertebrate RAR cDNA sequences are compared with those of other nuclear sequences and molecular phylogenetic trees. RAR is a kind of animal that can be used as a tool to control the alpha, beta and gamma of the animal. The first is the first time that a vertebrate has been identified. RAR mRNA is expressed in the cytoplasm and induced in the cytoplasm. 3. The cDNA of the gene was isolated from the cDNA of the gene. The first step is to remove the cDNA from the database. The possibility of functional molecules directly involved in the induction of dedifferentiation of the epithelium of the gill cavity was demonstrated by the possibility that several kinds of cDNA could be secreted in the supernatant of the cell during acid treatment.