ホヤ初期胚細胞の運命決定に関与する遺伝子の機能解析

海鞘早期胚胎细胞命运决定基因的功能分析

• 批准号: 13202049
• 负责人: 藤原 滋樹
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kochi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13202049/
• 关键词: ホヤ; 胚発生; 遺伝子発現調節; 細胞分化; EST; in situ ハイブリダイゼーション; マイクロアレイ; RNAi

本研究では,カタユウレイボヤの網羅的cDNA解析のデータ(配列および発現)を活用し,発生における細胞運命決定のメカニズムを総合的に捉えることをめざした。1.カタユウレイボヤ卵割期胚の14749クローン(5660クラスター)の配列解析を完了した(解析は京大・佐藤矩行研究室とアカデミアシークエンシングセンターのご協力による)。このうち1200以上のクラスターについてin situ解析を行った。調べた遺伝子の半数以上は,まったく新規の配列であったり,これまで発生生物学分野で注目されてこなかったものであった。またそれらの遺伝子の発現パターンも,これまでの知識から説明できない複雑なものが多く,発生における細胞の運命決定機構について多くの示唆を得た。2.ホヤ胚を用いたRNAiの技術をほぼ確立した。この手法により卵割期に発現する割球特異的転写因子を含む数十の遺伝子の機能解析を行った。RNAiによる発現抑制は起こったが,機能阻害や形態異常は顕著ではなかつた。反応経路がredundantであるためなのかRNAiの技術的な問題なのか現在は不明である。3.米国Joint Genome Institute(JGI)が公表しているゲノム配列を検索して,割球特異的転写因子の遺伝子の上流調節領域を同定した。現在これをクローニングし,レポーター遺伝子を作製中である。4.当初計画にはなかつたが,京大・佐藤矩行教授,遺伝研・五條堀孝教授・中澤真澄博士との共同研究として,ホヤ胚のcDNA約10000クラスターを載せたマイクロアレイを作製した。今後、これを利用してさまざまな発生制御遺伝子のスクリーニングを行う。

The purpose of this study is to analyze the cDNA analysis of the Internet. In this study, you will find that you can use it efficiently. In this study, you will learn how to use it efficiently. In this study, you will learn how to use it actively. 1. This is the end of the arrangement and analysis of the embryo during the period of egg cutting in 14749 (5660). This is the end of the analysis of the arrangement and analysis of the embryo during the period of egg cutting (5660). This is more than 1200. Please do not parse a row of in situ. There is more than half of the total number of children, the number of new regulations is divided into two groups, and the biological field is divided into two groups. You can tell if there is a problem. If you know that there are many problems, you must know that there are too many problems, and that the order of the system determines that the organization can tell you how to do so. two。 Please use the RNAi technology to make sure that you are in charge of the operation. During the egg cut period, the writing factor of the cut ball feature is more than ten times that the sub-machine can analyze the data. The RNAi system can suppress the start-up of the system, and the machine can block the configuration of the system. The problem with anti-redundant technology is now unknown. 3. The Joint Genome Institute (JGI) of the United States is listed in the public table, and the writing factor of the cutter feature is the same as that of the domain. Now that we are in the middle of the war, we are now in the middle of a war. 4. In the original plan, Professor Matsuhiko Sato of Peking University, Professor Horiko Sato of the University of Beijing, Dr. Makoshi Makoto of Professor Horixiao of Beijing University worked together to study the disease, and the cDNA of the baby was about 10000 yuan. From now on, you will be able to make sure that you can make sure that you are in the right place.

项目成果

Fujiwara, S.: "Gene expression profiles in Ciona intestinalis cleavage-stage embryos"Mechanisms of Development. (印刷中). (2002)

Fujiwara, S.：“海鞘卵裂期胚胎的基因表达谱”发育机制（出版中）。