ノシセプチン受容体欠損マウスに特異的な新規遺伝子の単離と解析

伤害感受素受体缺陷小鼠特异性新基因的分离和分析

• 批准号: 11780552
• 负责人: 宝谷 剛志
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780552/
• 关键词: ノシセプチン; ノシセプチン受容体; ノックアウトマウス; cDNAサブトラクション; 新規遺伝子; クローニング

ノシセプチン受容体ノックアウト(KO)マウス脳組織において発現が増加ないし減少する新規遺伝子断片の単離をcDNAサブトラクション法により行なった。KOにより発現が増加する新規遺伝子断片"H-E69"および"H-E91"、発現が減少する"E-H17"の3クローンについて完全長cDNAのクローニングおよび組織内発現分布について解析した。"H-E69":364アミノ酸をコードする全長3.45kbのcDNAで、ノーザンブロッティングから脳での発現が最も強かったが、肺・心臓・精巣・消化器などにも広く発現が認められた。酵母・線虫・ショウジョウバエなどで広く保存された2回膜貫通型タンパク質がコードされ、生命活動に必須なタンパクと推定される。"H-E91":562アミノ酸をコードする全長3.0kbのcDNAで、脳でのみ特異的に発現が認められた。タンパクのN末端部分はヒトAdenylate kinase(Ak)type1と中等度の、C末端はヒトAk type5と非常に高いホモロジーをもつが、Akモチーフを2つもつ点で現在までに知られているAkとは異なった新しいタイプの酵素タンパクであると考えられる。"E-H17":323アミノ酸をコードする全長2.5kbのcDNAで、脳・肝臓・心臓で特に強く発現が認められた。4回膜貫通型タンパク質と推定され、Mitochondrial carrier proteinsモチーフをもつことから、ミトコンドリア膜タンパクと考えられる。各mRNA発現をIn situ hybridizationで解析した結果、ノシセプチン受容体発現が豊富な視床下部腹内側核・外側中隔核・海馬歯状回において、その発現がKOにより増加あるいは減少していることが確かめられた。今後は、これら遺伝子産物の機能の解明およびノシセプチン受容体を介する情報伝達にどのように関与するのかを詳らかにしていきたい。

The expression of new cDNA fragments increased and decreased in the tissue of the recipient (KO), and the expression of cDNA fragments increased and decreased in the tissue of the recipient (KO). The new cDNA fragment "H-E69" and "H-E91" were found in the increase of KO, and the complete cDNA fragment "E-H17" was found in the decrease of KO. "H-E69":364. The full-length 3.45kb cDNA of the cDNA fragment was identified as the most powerful fragment of the cDNA fragment. Yeast, thread worm, and other organisms are preserved in two layers of membrane. "H-E91":562 A full-length 3.0kb cDNA was generated from the cDNA library, and its unique expression was identified. Adenylate kinase(Ak)type1: moderate, Ak type5: very high, Ak type 2: high, Ak type 3: high, Ak type 4: high, Ak type5: high, Ak type 5: "E-H17":323 A full-length cDNA of 2.5 kb was found in the mouse genome. 4. Presumption of membrane penetration type, Mitochondrial carrier proteins, etc. Each mRNA expression was analyzed In situ hybridization, and the receptor expression was enriched in the ventral medial nucleus of the inferior optic bed, the lateral septal nucleus, and the hippocampal dentate gyrus. In the future, the function of the gene product will be explained in detail.

项目成果

Noriyuki Nishida: "A mouse prion protein (PrP) transgene rescues Purkinje cell degeneration and demyelination in mice deficient for PrP"Lab.Invest.. 79・6. 689-697 (1999)

Noriyuki Nishida：“小鼠朊病毒蛋白 (PrP) 转基因可挽救 PrP 缺陷小鼠的浦肯野细胞变性和脱髓鞘”Lab.Invest.. 79・6 (1999)。

Teizo Ueyama: "Comparative distribution of GABAergic and peptide-containing neurons in the lateral lemniscal nuclei of the rat."Brain Res.. 849・1,2. 220-225 (1999)

Teizo Ueyama：“大鼠外侧丘系核中 GABA 能神经元和含肽神经元的比较分布。”Brain Res.. 849・1,2。

Miyuki Nishi: "RhoN,a novel small GTP-binding protein expressed predominantly in neurons and hepatic stellate cells."Molec.Brain Res.. 67・1. 74-81 (1999)

Miyuki Nishi：“RhoN，一种主要在神经元和肝星状细胞中表达的新型小 GTP 结合蛋白。”Molec.Brain Res.. 67・1 (1999)。

Takeshi Houtani: "Distribution of nociceptin/orphanin FQ precursor protein and receptor in brain and spinal cord : a study using in situ hybridization and X-gal histochemistry in the receptor-deficient mice."J.Comp.Neurol.. 424・3. 489-508 (2000)

Takeshi Houtani：“伤害感受肽/孤啡肽 FQ 前体蛋白和受体在脑和脊髓中的分布：在受体缺陷小鼠中使用原位杂交和 X-gal 组织化学的研究。”J.Comp.Neurol.. 424・3。 489-508 (2000)

Masahiko kase: "Distribution of neurons expressing α1G subunit mRNA of T-type voltage-dependent calcium channel in adult rat central nervous system"Neurosci.Lett.. 268・2. 77-80 (1999)

加濑正彦：“成年大鼠中枢神经系统中表达T型电压依赖性钙通道α1G亚基mRNA的神经元的分布”Neurosci.Lett.. 268・2（1999）。