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アグロバクテリウムを用いたダイズの高効率形質転換系の開発

利用农杆菌开发大豆高效转化系统

基本信息

批准号：
12760008
负责人：
穴井豊昭
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Saga University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12760008/
关键词：
ダイズアグロバクテリウムヘルパープラスミド VirG

项目摘要

本研究では、現在のところ効率的な外来遺伝子導入系が確立されていないダイズに対して、アグロバクテリウムを用いた外来遺伝子の導入法を適用することを目的として、新規ベクター系の開発と外来遺伝子導入効率の改善を試みた。本年度は、昨年度作成したpBio542の活性化VirG遺伝子を組み込んだヘルパープラスミドを保持するアグロバクテリウムLBM4404株を用いて、遺伝子導入実験を行った。その結果、イネカルスに対して今回作成したヘルパープラスミドを保持する菌株を用いた場合には、アセトシリンゴン(AS)非存在下で通常のLBA4404株を用る場合より数倍高い効率で外来遺伝子の導入が可能であった。しかしながら、100mg/lのAS存在下では導入効率に有意な差は認められず、ダイズ不定胚に対する感染効率の向上は認められなかった。また、ダイズ不定胚に対するアグロバクテリウムの感染効率に対する超音波処理および減圧浸潤処理の効果についても検討を行ったところ、一過的な遺伝子発現効率については多少の増加が認められたものの、安定した形質転換体を得るには至らなかったことから、ダイズに対するアグロバクテリウムを介した外来遺伝子導入系の確立のためには、更なる改良が必要であると考えられる。

This study aims to establish an effective foreign gene introduction system and apply the foreign gene introduction method used in the Aphrodite system to the development of a new foreign gene introduction system and improve the foreign gene introduction rate. This year, the active VirG gene group of pBio542 was established and maintained. The LBM4404 strain was used and the gene introduction was carried out. As a result, when the strain is used, the normal LBA4404 strain is used in the absence of AS, and the introduction of foreign genes is possible at several times higher efficiency. In the presence of AS at 100mg/l, the rate of infection was higher than that of the control group. The infection rate of ultrasonic treatment and pressure reduction infiltration treatment is discussed in detail. The infection rate of ultrasonic treatment and pressure reduction infiltration treatment is discussed in detail. The infection rate of ultrasonic treatment and pressure reduction infiltration treatment is discussed in detail. The infection rate of ultrasonic treatment and pressure reduction infiltration treatment is discussed in detail. The establishment and improvement of alien gene introduction system are necessary in order to improve the quality of gene introduction system.