一過性発現法を用いた希少さび病菌由来エフェクター候補遺伝子の探索

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前年度までに進展させた白色96穴多穴プレートを用いた一過的評価・実験系にさらなる改良を加え、384穴多穴プレートを用いた系においても、アグロバクテリウム法による一過性発現系が実施可能となった。具体的には使用するアグロバクテリウムの培養時の処理方法（温度、濃度など）について最適条件を模索した。これにより、スループットは大幅に向上し、エフェクター活性の実験にも使用可能となった。また、前年度に見出されていた、ジャスモン酸メチルアゴニスト（N-[5-(Trifluoromethyl)pyridin-2-yl]benzenesulfonamide）とは異なる新規低分子化合物が、一過性発現効率のエンハンサーとして合成化合物ライブラリーから見出された。ウクライナ危機の影響で、当該化合物の追加購入が難航し、これまでの所十分な特徴づけには至っていないが、研究費が得られれば受託合成サービス等を用いて対応するか、類似化合物を新規購入することなどが考えられる。一方、メダケ赤衣病菌（Stereostratum corticioides)の冬胞子堆からの核酸抽出法については、低分子化の回避よりもDNA抽出効率を重視し、全ガラス製のポッター式ホモジナイザーをゴム製ジョイントで電動モーターに連結して使用することとし、破砕液に対して、フェノールクロロホルム抽出操作の前に、プロテイナーゼKを高濃度SDS存在下で作用させる方法が有効であることが判明した。