麻痺性貝毒の迅速、簡便、高感度な新しいモニタリング法の開発

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麻痺性貝毒(PSP)の公定法であるマウス毒性試験法は、動物を用いた試験であるため、多検体の分析には費用及び労力を要する。従って、二枚貝中のPSPのモニタリングに際しては、マウス毒性試験法に先立つスクリーニング法として、迅速、簡便、高感度な多検体同時分析が可能な酵素免疫測定法(ELISA)を、二枚貝中のPSPの定性分析に用いることが有効であると考えられる。そこで、前年度、開発に成功したモノクローナル抗GTX2/3抗体を使って、直接競合ELISAによるPSPの測定系(PSP-ELISA)を構築し、その検出感度について検討した。その結果、GTX2/3、dc-GTX2/3、C1/C2、GTX1/4、STX及びneoSTXに対する検出下限値は、それぞれ0.15、0.18、0.19、1.09、1.50、22.93ng/mlと見積もられたことから、PSP-LISAは、公定法に従って調製された二枚貝抽出液を100倍に希釈した場合でも、neosTx以外のPSP成分は、二枚貝におけるPSPの安全基準値(801μg/むき身100g)以下の濃度で検出できることが明らかとなった。ELISAによる二枚貝中のPSPの定性分析では、全てのPSP成分を安全基準値以下の濃度で検出できることが重要である。しかし、PSPは非常に多くの成分から成るため、1つのELISAで全てのPSP成分を定性分析することは、非常に困難であると考えられる。今回、実験に使用したPSPの各成分(GTX2/3、dc-GTX2/3、C1/C2、GTX1/4、STX及びneoSTX)は二枚貝中で検出される主要なPSP成分であるが、それらの中のneoSTX以外の全てを安全基準値以下の濃度で検出可能なPSP-ELISAは、二枚貝中のPSPの定性分析法の1つとして有用であると考えられた。