ロドコッカス・エクイ強毒株の二次元電気泳動による蛋白質マッピング

通过二维电泳对高毒力马红球菌菌株进行蛋白质图谱分析

• 批准号: 12760217
• 负责人: 角田 勤
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12760217/
• 关键词: ロドコッカス・エクイ; 液性免疫応答; 病原性プラスミド; 二次元電気泳動法

ロドコッカス・エクイの病原性にプラスミドが関与していることが知られている。この病原性プラスミド上にはVap(virulence associated protein)遺伝子群が存在しており、前年度の結果から少なくともVapA, VapCおよびVapDはin vivoで発現し、宿主により認識されていることが示唆された。本年度は、VapAならびにVapDのワクチン標的分子としての可能性を検討する目的で以下の実験を行った。【マウスを用いた実験系】VapAのB細胞エピトープ、T細胞エピトープのそれぞれ、あるいは双方を含む合成ペプチド(ハイブリッドペプチド)、および組み換えVapDにてマウスを免疫し、抗体応答測定と感染防御試験を行った。B細胞エピトープを含むペプチド、ハイブリッドペプチドで最終免疫後にIgGlとIgMの上昇が確認された。ロドコッカス・エクイ強毒株の攻撃感染を行ったところ、脾臓と肺の菌数に減少傾向が見られたが、対照群と比べて有為な差はなかった。組み換えVapD免疫マウスにおいてもIgGlとIgMの上昇が確認されたが、免疫マウスは強毒株による攻撃感染に対して防御されなかった。【ウマを用いた実験系】ロドコッカス・エクイの自然宿主であるウマを用いて上述のマウスと同様免疫をおこない、それぞれの抗原に対する抗体応答を調べた。ハイブリッドペプチド免疫馬では、IgGbが上昇し、続いてIgGaが上昇した。組み換えVapD免疫馬では、IgGaとIgGbが同時期に上昇したが、IgGaの上昇がより顕著であった。【総括】病原性プラスミド上にコードされているVap遺伝子群のうち、、VapA, VapC, VapDは宿主であるウマに特異的な液性免疫応答を惹起することが判明した。今回の実験では免疫マウスではVapAならびにVapDに対して液性免疫応答を誘導することができたが、有為な感染防御は見られなかった。その理由としてロドコッカス・エクイはマクロファージ内で増殖する細胞内寄生菌であることから、液性免疫よりも細胞性免疫が重要な役割を担っているものと考えられた。したがって今後はDNAワクチンなど細胞性免疫応答を惹起する免疫方法の検討が必要であると考えられた。

The disease is caused by a variety of factors. The pathogen is identified by Vap(virus-associated protein) gene subgroup. The results of the previous year showed that Vap A, Vap C and Vap D were detected in vivo. This year, the following objectives were implemented for the purpose of exploring the possibility of vaping and vaping. The B-cell and T-cell immune systems of VapA and VAPD are composed of two parts: VAPD, VAPD, VAPD and VAPD. B cells contain IgGl and IgM. The number of bacteria in the lung tends to decrease. IgGl IgM was detected by the virus. The immune response to the antigen is modulated by the immune response to the antigen. IgGb rises, IgGa rises, IgGa rises. IgGa and IgGb rise at the same time [Summary] Pathogenic viruses are identified in the host by specific fluid immune responses to Vap gene subgroups such as VAP, VapA, VapC, VapD. Now, we have to protect ourselves from infection. The reason for this is that intracellular parasites are important for cellular immunity. In the future, it is necessary to investigate the development of DNA and cellular immune response.

项目成果

Takai,S.: "Isolation of virulent Rhodococcus equi from native Japanese horses."J.Equine Sci.. 11. 7-14 (2000)

Takai,S.：“从日本本土马中分离出有毒的马红球菌。”J.Equine Sci.. 11. 7-14 (2000)

Takai,S: "Isolation of virulent Rhodococcus equi from native Japanese horses."Comp.Immun.Microbiol.Infect.Dis.. 24. 123-133 (2001)

Takai,S：“从日本本土马中分离出有毒的马红球菌。”Comp.Immun.Microbiol.Infect.Dis.. 24. 123-133 (2001)

Takai, S(9名中6番目): "Prevalence of virulent Rhodococcus equl in soil from five R. equl-endemic horse-breeding farms and restriction fragment length polymorphisms of virulence plasmids in isolates from soil and infected foals in Texas"J Vet Diagn Invest.. 13

Takai, S（9 中的第 6）：“来自德克萨斯州五个红球菌地方性养马场的土壤中有毒力红球菌的流行情况以及来自德克萨斯州土壤和受感染马驹的毒力质粒分离株的限制性片段长度多态性”J Vet Diagn Invest .. 13

Takai, S(7名中5番目): "Two new variants of the Rhodococcus equi virulence plasmid, 90 kb type III and type IV, recovered from a foal in Japan"Vet Microbiol.. 82(4). 373-381 (2001)

Takai, S（7 个中的第 5 个）：“从日本小马驹中回收的马红球菌毒力质粒的两个新变体，90 kb III 型和 IV 型”Vet Microbiol.. 82(4) (2001)。 ）

Takai, S(7名中5番目): "Isolation of virulent Rhodococcus equi from native Japanese horses"Comp Immunol Microbiol Infect Dis.. 24(2). 123-133 (2001)

Takai, S（7 篇中的第 5 篇）：“从日本本土马中分离出有毒的马红球菌”Comp Nutritionol Microbiol Infect Dis.. 24(2) (2001)。