GABA受容体におけるニューロアクティブステロイドの作用部位の同定

鉴定神经活性类固醇对 GABA 受体的作用位点

• 批准号: 12770052
• 负责人: 上野 晋
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770052/
• 关键词: ニューロステロイド; GABA受容体; グリシン受容体; アフリカツメガエル卵母細胞; ニューロアクティブステロイド

細胞膜に存在する神経伝達物質受容体に作用して神経の興奮性を変化させるステロイドホルモンをニューロアクティブステロイド、あるいはニューロステロイド(以下NSと略)と呼ぶ。NSが作用する神経伝達物質受容体の一つにGABA(γ-アミノ酪酸)受容体があるが、その作用部位については未だ明らかではない。本研究では5α-THDOC(アロテトラヒドロデオキシコルチコステロン)を用いてGABA受容体におけるNSの作用部位を同定することを試みた。アフリカツメガエル卵母細胞発現系を用いた二電極膜電位固定法により、リガンド誘発電流に対する5α-THDOCの作用について検討した。最大反応の5〜10%のリガンド誘発電流に対して、まずGABAρ1受容体では5α-THDOC(20μM)により134±19%の増強が認められた。一方、グリシンα1受容体では45±7%しか増強反応が認められなかった。そこでN末端より膜貫通領域の3番目(TM3)までの部分がグリシン受容体α1サブユニット、TM3〜C末端までがGABA受容体ρ1サブユニットで構築されたキメラ体C1について検討したところ、GABAρ1受容体とほぼ同等の5α-THDOCによる増強作用が濃度依存的に認められた。一方C1と対称的なキメラ体C2ではグリシンα1受容体と同様に増強作用が弱かった。さらにN末端よりTM4の直前までの部分がグリシン受容体α1サブユニット、TM4〜C末端までがGABA_A受容体α1サブユニットで構築されたキメラ体を新たに構築し検討したところ、20μMの5α-THDOCによってGABAρ1受容体と同程度の増強作用(128±43%)を認めた。本研究から、GABA受容体サブユニット上には5α-THDOCの作用に必須な特異的領域が存在し、それはサブユニット上のTM4〜C末端の間に存在することが示唆された。

Cell membrane is affected by the presence of a substance receptor in the brain, which causes the excitability of the brain to change. NS-induced neuroleptic substance receptor A GABA(γ-aminobutyric acid) receptor A GABA receptor B In this study, we tried to identify the site of action of NS in the GABA receptor using 5α-THDOC. The development of oocytes was investigated by two-electrode membrane potentiometry in response to the action of 5α-THDOC. 5 ~ 10% of the maximum response was induced by 5α-THDOC(20μM) in the GABAρ1 receptor, and 134±19% of the maximum response was induced by 5α-THDOC(20μM) in the GABAρ1 receptor. A party, a party The N-terminal part of the membrane penetration domain (TM3) is partially separated from the GABA receptor α1, TM3 ~ C-terminal part of the membrane penetration domain (TM3), and the GABA receptor ρ1 is partially separated from the N-terminal part of the membrane penetration domain (TM3). One side C1 and the other side C2 have the same effect on the other side. The N-terminal and TM4-C-terminal regions of GABA receptor α1 and α 1 were found to have the same enhancement effect (128±43%) as that of 5α-THDOC at 20μM. In this study, GABA receptors were found to exist in specific domains necessary for the action of 5α-THDOC, and in the TM4-C-terminal region of GABA receptors.

项目成果

Geoffrey S.Findlay: "Allosteric modulation in spontaneously active mutant γ-aminobutyric acid_A receptors in frogs"Neuroscience Letters. 293. 155-158 (2000)

Geoffrey S.Findlay：“青蛙自发活性突变型 γ-氨基丁酸_A 受体的变构调节”《神经科学快报》293. 155-158 (2000)。

Susumu Ueno: "Studies on the sites of neurosteroid action on recombinant GABA receptors"The Japanese Journal of Pharmacology. 88Supplementl. 153 (2002)

Susumu Ueno：“神经类固醇对重组 GABA 受体作用位点的研究”《日本药理学杂志》。