脂質メデイエイター関連遺伝子発現の空間的・時間的な制御による肺疾患モデルの解析

通过脂质介质相关基因表达的时空控制分析肺部疾病模型

• 批准号: 12770289
• 负责人: 田澤 立之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770289/
• 关键词: アデノウイルスベクター; プラスミドベクター; 局所への遺伝子導入; 組織特異的プロモーター; プロスタグランジンI2合成酵素; トロンボキサンA2合成酵素; 肺癌細胞株; 経気道的投与

肺疾患モデルマウスにおいて組織細胞各々に特異的な遺伝子発現モデルを作り、プロスタグランジン(PG)I2合成酵素またはトロンボキサン(TX)A2合成酵素を各細胞に発現させ、PGI2、TXA2の産生量の変化がどう病態に影響するかの解析を試みた。移植腫瘍モデルでの実験では、大腸癌細胞株C26および肺癌細胞株(LLC)を基盤にTet-onシステムによる発現調節モデルの作成を試みたが、テトラサイクリン投与に対する良好な発現反応性を有する細胞株を得ることが困難であったため、PGIS、TXAS遺伝導入細胞株を用いた移植腫瘍モデルを用いて、両者の基質であるPGH2の合成酵素COX1、COX2を阻害するインドメサシンを経口投与してPGI2、TXA2の産生を調節する系を作った。TXA2遺伝子導入による腫瘍増殖促進・腫瘍血管増生作用はインドメサシンにより抑制され(p<0.05)、COX2阻害剤NS398でも同様の抑制が見られた。PGI2の腫瘍増殖・腫瘍血管抑制作用はNS398投与下で抑えられる傾向がみられた。インドメサシン投与では逆にこれら作用を増強し、C26-Balb/cマウスの系では接種したPGIS遺伝子導入細胞由来の腫瘍は徐々に退縮、消失した。LLC-C57BL/6マウスの系でも同様の腫瘍抑制効果が見られた(p<0.05)。これらの増強作用はPGIS阻害剤トラニルサイプロミン投与で抑制された(p<0.05)。インドメサシンとPGIS遺伝子導入の併用が動物モデルで強力な抗腫瘍効果をもつことが初めて示された。また肺線維症モデルの作成を試み、ブレオマイシン経鼻投与の最適化により、比較的安定したモデルマウスの作成が可能となった。アデノウイルスベクターに変えて肺特異的な発現を実現するためマクロ凝集アルブミン・プラスミドDNA静脈投与を用い、レポーター遺伝子の肺でのより特異的な発現をみた。

Lung diseases include tissue and cell-specific gene expression, gene expression, PG/I2 synthase expression, TX/A2 synthase expression, PGI2 and TXA2 production, and pathological analysis. Transplantation of tumor cells in colorectal cancer cell line C26 and lung cancer cell line (LLC) Tet-on-cell system development and regulation of tumor cells in vitro production of Tet-on-cell system development and regulation of tumor cells in vitro production of Tet-on-cell system development. COX-2 is the inhibitor of PGI-2 and TXA-2. TXA2 gene induced tumor proliferation and tumor angiogenesis were inhibited (p<0.05), while COX-2 inhibitor NS-398 inhibited the same. PGI2 has a tendency to inhibit tumor proliferation and tumor angiogenesis by NS398. C26-Balb/c system was inoculated with PGIS gene and the origin of PGIS gene was reduced. LLC-C57BL/6 had the same effect on tumor inhibition (p<0.05). The enhancement effect of this factor was opposite to that of PGIS (p<0.05). The combination of PGIS gene and PGIS gene was used to detect and detect the effect of anti-tumor. The preparation of lung diseases is tried and optimized, and the stability of lung diseases is compared. The lung specific expression of DNA was detected by intravenous administration of DNA.

项目成果

Tazawa R,Prasenohadi,Tanaka M,Satoh G,Narumi K,Saijo Y,Hagiwara K,and Nukiwa T.:: "Ex vivo transfection of prostaglandin (PG) I2 synthase gene reduced tumor growth of Lewis lung carcinoma (LLC) cells"Am J Resp Crit Care Med. 161. A677 (2000)

Tazawa R、Prasenohadi、Tanaka M、Satoh G、Narumi K、Saijo Y、Hagiwara K 和 Nukiwa T.：“体外转染前列腺素 (PG) I2 合酶基因可减少 Lewis 肺癌 (LLC) 细胞的肿瘤生长”

Maemondo M, Narumi K, Saijo Y, Usui K, Tahara M, Tazawa R, Hagiwara K, Matsumoto K, Nakamura T, Nukiwa T: "Targeting angiogenesis and HGF function using an adenoviral vector expressing the HGF antagonist NK4 for cancer therapy"Mol Ther. 5. 177-185 (2002)

Maemondo M、Narumi K、Saijo Y、Usui K、Tahara M、Tazawa R、Hagiwara K、Matsumoto K、Nakamura T、Nukiwa T：“使用表达 HGF 拮抗剂 NK4 的腺病毒载体靶向血管生成和 HGF 功能用于癌症治疗”Mol

Usui K, Sasahara Y, Tazawa R, Hagiwara K, Tsukada S, Miyawaki T, Tsuchiya S, Nukiwa T.: "Recurrent pneumonia with mild hypogammaglobulinemia diagnosed as X-linked agammaglobulinemia in adults"Respir Res. 2. 188-192 (2001)

Usui K、Sasahara Y、Tazawa R、Hagiwara K、Tsukada S、Miyawaki T、Tsuchiya S、Nukiwa T.：“患有轻度低丙种球蛋白血症的复发性肺炎，诊断为成人 X 连锁无丙种球蛋白血症”Respir Res。

Pradono P, Tazawa R, Maemondo M, Tanaka M, Usui K, Saijo Y, Hagiwara K, Nukiwa T.: "Gene transfer of thromboxane A(2) synthase and prostaglandin I(2) synthase antithetically altered tumor angiogenesis and tumor growth"Cancer Res. 62. 63-66 (2002)

Pradono P、Tazawa R、Maemondo M、Tanaka M、Usui K、Saijo Y、Hagiwara K、Nukiwa T.：“血栓素 A(2) 合酶和前列腺素 I(2) 合酶的基因转移相反地改变了肿瘤血管生成和肿瘤生长”

Tanaka M,Saijo Y,Sato G,Suzuki T,Tazawa R,Satoh K,Nukiwa T.: "Induction of antitumor immunity by combined immunogene therapy using IL-2 and IL-12 in low antigenic lewis lung carcinoma."Cancer Gene Therapy. 7. 1481-1490 (2000)

Tanaka M、Saijo Y、Sato G、Suzuki T、Tazawa R、Satoh K、Nukiwa T.：“在低抗原性刘易斯肺癌中使用 IL-2 和 IL-12 联合免疫基因治疗诱导抗肿瘤免疫。”癌症基因治疗