臍帯血細胞を用いた心筋細胞の分化誘導

使用脐带血细胞诱导心肌细胞分化

• 批准号: 13877110
• 负责人: 福田 恵一
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877110/
• 关键词: 臍胎血; 心筋細胞; 分化誘導; 血管内皮細胞; 再生医学; 多能性幹細胞; 心不全; 細胞移植; 発生分化; 幹細胞; 臍帯血

【目的】臍帯血より心筋分化能を有する可能性のある細胞を単離し、増殖し、分化誘導を試みた。【方法】(1)臍帯血よりauto MACSを用いて、CD45陰性、CD29陽性、CD34陰性、CD44陽性の細胞群を単離し、ファイブロネクチン塗布培養皿上に接着させた。(2)この細胞を培養し、細胞の増殖曲線を作成した。(3)この細胞の表面抗原をFACS解析した。(4)この細胞をインスリン存在下で培養し、脂肪細胞への分化を観察した。(5)この細胞を0.1mMデキサメサゾン、0.05mMアスコルビン酸-2リン酸、10mMβ-グリセロフォスフィト存在下で培養し、骨芽細胞への分化を観察した。【結果】(1)臍帯血より上記表面抗原の抗体を利用することにより、付着系の間葉系幹細胞が回収できた。この細胞はin vitroである程度増殖させることが可能であった。(2)増殖曲線は一週間で3倍程度の増加速度であった。(3)インスリン存在下ではこの細胞は脂肪細胞に分化した。(4)デキサメサゾン、アスコルビン酸-2リン酸、β-グリセロフォスフィト存在下ではこの細胞は骨芽細胞に分化した。フォンコッサ染色陽性の細胞が観察された。【結論】臍帯血細胞中には間葉系の幹細胞が存在した。この細胞が心筋細胞に分化するかはさらなる研究が必要と考えられた。

[Objective] To explore the possibility of differentiation of umbilical cord blood and its differentiation. [Methods](1) Umbilical cord blood auto-MACS, CD45-negative, CD29-positive, CD34-negative, CD44-positive cell populations were isolated and cultured on a plate. (2)Cell culture and cell growth curve were constructed. (3)FACS analysis of these cell surface antigens. (4)The differentiation of adipocytes was observed in culture in the presence of adipocytes. (5)The cells were cultured in the presence of 0.1mM glucose, 0.05mM glucose-2-carboxylic acid, and 10mM β-glucose, and bone bud differentiation was observed. [Results](1) Umbilical cord blood surface antigen antibody utilization, and related lines of mesenchymal stem cells were recovered. The cell is in vitro. (2)The curve increases three times faster than a week ago. (3)In the presence of a variety of factors, fat cells differentiate into fat cells. (4)In the presence of The positive cells were observed. [Conclusion] Stem cells of mesenchymal lineage exist in umbilical cord blood cells. It is necessary to study the differentiation of cardiac muscle cells.

项目成果

Keiichi Fukuda: "Application of mesenchymal stem cells for the regeneration of cardiomyocyte and its use for cell transplantation therapy."Human Cell. 13. 83-94 (2003)

Keiichi Fukuda：“间充质干细胞在心肌细胞再生中的应用及其在细胞移植治疗中的应用。”《人类细胞》。

Keiichi Fukuda: "Use of adult mesenchymal stem cells for regeneration of cardiomyocyte and its application to cell transplantation therapy"J Bone Marrow Transplant. (in press). (2002)

Keiichi Fukuda：“成体间充质干细胞用于心肌细胞再生的用途及其在细胞移植治疗中的应用”J Bone Marrow Transplant。

H Kodama, K Fukuda, et al.: "Selective involvement of p130Cas/Crk/Pyk2/c-Src in endothelin-1-induced JNK activation."Hypertention. 41. 1372-1379 (2003)

H Kodama、K Fukuda 等人：“p130Cas/Crk/Pyk2/c-Src 选择性参与内皮素-1 诱导的 JNK 激活。”高血压。

Motoaki Sano Keiichi Fukuda et al.: "ERK and p38MAPK, but not NF-κB, are critically involved in reactive oxygen species-mediated induction of IL-6 by angiotensin II in cardiac fibroblasts"Circ Res. 89. 661-669 (2001)

Motoaki Sano Keiichi Fukuda 等人：“ERK 和 p38MAPK，但不是 NF-κB，在心脏成纤维细胞中血管紧张素 II 介导的活性氧介导的 IL-6 诱导中发挥着重要作用”Circ Res. 89. 661-669 (2001) ）

Ariizumi T, Fukuda K, et al.: "Amphibian in vitro heart induction : a simple and reliable model for the study of vertebrate cardiac development"Int J Dev Biol.. 47. 405-410 (2003)

Ariizumi T、Fukuda K 等：“两栖动物体外心脏诱导：脊椎动物心脏发育研究的简单可靠模型”Int J Dev Biol.. 47. 405-410 (2003)