心臟弁に発現する血管新生抑制因子テノモジュリンの機能解析

心脏瓣膜中表达的血管生成抑制剂替诺调节素的功能分析

• 批准号: 19659206
• 负责人: 福田 恵一
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659206/
• 关键词: 心臓弁膜症; 血管新生; テノモジュリン; マトリックスメタロプロテアーゼ; 腱索; 僧帽弁閉鎖不全症

心臓において、弁膜は無血管組織であることが知られているが、様々な弁膜疾患でその無血管性が破綻していることが知られている。弁膜同様無血管組織である腱索の構造維持及び病態発症にいたる分子的メカニズムについてはいまだ未知である。今回我々はChondromodulin-IのC末端と相同性を有し、腱組織から抽出されたTenomodulinという膜貫通蛋白質に特に注目し、腱索の構造維持及び病態発症にいたる分子的メカニズムについて解析した。(1)マウス各胎生期、成獣およびブタの心臓を用いて、RT-PCR法、Western blotting法により腱索におけるTenomoduinの発現を解析した。胎生14.5日よりTenomodulinの発現は認められ、腱索特異的であった。(2)ヒト剖検例及び手術例における腱索組織標本を作製し、HE・EVG染色及び各種一次抗体(Tenomodulin,VEGF-A,MMP-1,2,3,9,13等)を用いた免疫組織化学染色を施行、病態発生のメカニズムについて解析した。正常ヒト腱索において、Tenomodulinは内皮下のエラスチンが豊富な層に同心円状に発現していた。ヒト腱索断裂症例ではTenomodulinの発現は断裂部に一致し消失しており、同部位にはVEGF-A、MMP-1,2,13の強い発現、炎症性細胞浸潤、異常な新生血管が認められた。(3)腱索間質細胞の初代培養を行い、その培養上清を用いてヒト冠動脈内皮細胞の血管管腔形成能、遊走能に対する作用を解析した。腱索細胞の培養上清には血管内皮細胞の管腔形成能及び遊走能を抑制する作用が認められ、これらの作用はTenomodulinのsiRNAを用いることにより減弱させることができた。(4)犬の腱索損傷モデルを作成し、腱索の組織学的変化を経時的に評価した。腱索の内部(中心部)に向かい経時的に新生血管、VEGF-A、MMPの発現が認められるようになり、ヒトの腱索断裂組織における所見と酷似していた。Tenomodulinは血管新生挿制因子として腱索構造の維持に重要であり、Tenomodulinの欠失・血管新生促進・MMP活性化が複合的に関与し腱索の変性さらには断裂をきたすメカニズムが示唆された。

Heart viscera に お い て, chemical film は avascular tissue で あ る こ と が know ら れ て い る が, others 々 な chemical membrane disease で そ の without vascular が flaw し て い る こ と が know ら れ て い る. Chemical membrane with others without vascular tissue で あ る chordae tendineae の maintain and び pathological 発 disease に い た る molecules メ カ ニ ズ ム に つ い て は い ま だ unknown で あ る. Today to my 々 は Chondromodulin -i の C terminal と identity を し, tendon tissue か ら spare さ れ た Tenomodulin と い う transmembrane protein に に attention し, chordae tendineae の maintain and び pathological 発 disease に い た る molecules メ カ ニ ズ ム に つ い て parsing し た. (1) マ ウ ス TaiShengQi, into 獣 お よ び ブ タ の heart perforatien を use い て, rt-pcr, Western blotting method に よ り chordae tendineae に お け る Tenomoduin の 発 now を parsing し た. At 14.5 days of gestation, よ よ Tenomodulin <s:1> shows よ recognition められ and tendine-specific であった. (2) ヒ ト cutting 検 cases and び surgery cases に お け る し the chordae tendineae tissue specimens を cropping, HE dyeing and び EVG an antibody (Tenomodulin, VEGF - A, MMP 1,2,3,9,13) を with い た immunohistochemical staining を enforcement, pathological 発 の メ カ ニ ズ ム に つ い て parsing し た. Normal ヒ ト chordae tendineae に お い て, Tenomodulin は in subcutaneous の エ ラ ス チ ン が aboundant な layer に concentric has drifted back towards &yen; shape に 発 now し て い た. Cases of ヒト Tenomodulin rupture で present with <s:1> consistent rupture site に disappearance <s:1> てお <s:1> strong <s:1> presence of に VEGF-A, MMP-1,2,13 <s:1> at the same site, inflammatory cell infiltration, abnormal な neovascularization が identification められた. (3) the chordae tendineae mesenchymal cells の original line を い, そ の culture supernatant を with い て ヒ ト coronary artery endothelial cells の vascular lumen formation energy, can walk に す seaborne る role を parsing し た. の chordae tendineae cell culture supernatant に は endothelial cells の lumen formed and び walk can suppress す を る role が recognize め ら れ, こ れ ら の role は Tenomodulin の siRNA を with い る こ と に よ り abate さ せ る こ と が で き た. (4) For the histological changes of the tendon cord tissue and the tendon cord tissue in dogs, the モデ を を is used to make the tissue, and the に evaluation of the histological changes of the tendon cord tissue is conducted を over time. Chordae tendineae の internal (center) to か に い 経 に angiogenesis, VEGF - A, MMP の 発 が now recognize め ら れ る よ う に な り, ヒ ト の tendon ruptures organization に お け と る see resembles し て い た. Tenomodulin は angiogenic factor と grip system し て chordae tendineae tectonic の maintain に important で あ り, Tenomodulin の owe loss, promote angiogenesis, MMP activation が composite に masato and し chordae tendineae の - sex さ ら に は fracture を き た す メ カ ニ ズ ム が in stopping さ れ た.

项目成果

The anti-angiogenetic factor, Tenomodulin, has a pivotal role in maintaining avascularity of chordae tendineae cordis

抗血管生成因子 Tenomodulin 在维持腱索无血管性方面具有关键作用

• 发表时间: 2007
• 作者: Naritaka Kimura;Daihiko Hakuno;Chisa Shukunami;Yuji Hiraki;Ryohei Yozu;Keiichi Fukuda
• 通讯作者: Keiichi Fukuda