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生体内で持続発現を可能にする新規レトロウイルスベクターの開発

开发一种能够在体内持续表达的新型逆转录病毒载体

基本信息

批准号：
13877159
负责人：
松岡雅雄
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

1)マウスES細胞における抗サイレンシング効果の検討幹細胞を標的とした遺伝子治療への応用性を検討する目的で、マウスES細胞CCEにおけるウニArsインスレーターを有するベクターの抗サイレンシング効果を検討した.この試験においてArsインスレーターによる抗サイレンシング効果が認められたが、その効果はArsインスレーターの挿入方向に依存していた。2)インスレーター間の能力比較異なるインスレーター間の効果の相違を検討する目的で、ウニArs及びニワトリHS4インスレーターによる抗サイレンシング効果を比較した。いずれかのインスレーターを含むマウス白血病ウイルス由来ベクターを骨髄由来細胞HL60に導入して抗サイレンシング効果を検討したところ、いずれのインスレーターも抗サイレンシング効果を有しており、その活性は同程度であった。3)Arsがベクター内部のクロマチン構造に及ぼす影響Arsインスレーターによる抗サイレンシング効果の作用機序を明らかにする目的で、Arsインスレーターがベクター内部のクロマチン構造へ及ぼす影響を検討した。ヒストンH3のアセチル化をクロマチン免疫沈降法により測定し、クロマチンの活性化レベルの指標とした。内部プロモーターであるサイトメガロウイルス(CMV)プロモーターにおいては、サイレンシングが回避されたベクターで高度なアセチル化が認められが、Arsインスレーターのアセチル化レベルは抗サイレンシング効果の有無とは相関しなかった。このことから、Arsインスレーターによる抗サイレンシング効果にはベクター内部のクロマチン構造の維持が関与している可能性が示唆された。

1) ES Cell Anti-Stem Cell Response and Evaluation of Stem Cell Response and Gene Therapy Efficacy This test results in a change of direction. 2) Comparison of the ability between the different types of equipment and the results of the different types of equipment. The results of the study showed that there was no significant difference in the activity between the two groups. 3) The structure and influence of Ars on the internal structure of Ars are discussed. An indicator of the activity of keratinocytes was measured by the keratinocyte immunosedimentation method of SusentH3. The inner part of the film is called the film. The film is called the film. The possibility of maintaining the internal structure of the system is shown in the table below.