成人T細胞白血病に対する遺伝子工学を用いた治療法の開発

点击翻译按钮获取中文摘要

1.殆どの成人T細胞白血病細胞にFas抗原が高発現しており抗Fas抗体、Fas ligandを加えることによりアポトーシスを誘導できることが明らかとなった。2.一部のATL症例(2/47例)ではFas抗原の発現がみられずFas抗体によってもアポトーシスの誘導が起こらないことが明らかにした。Fas陰性のATL細胞はFas抗体耐性であるだけでなくデキサメサゾンなどでもアポトーシスを誘導できず他のアポトーシスの系にも異常があることを示唆された(第55日本癌学会にて発表)。3.Fas陰性ATL細胞の遺伝子レベルの解析では一例の一方のalleleに5bpの欠損と1bpの挿入がありpremature terminationが起こっており、もう一方のalleleではexon4のexon skippingが起こっていることが明らかとなった。本症例では、このためFas抗原の欠損が起こっていることが明らかとなった(第55回日本癌学会にて発表)。第二例目のFas陰性のATLではRNAレベルでの発現がないことが明らかとなった。4.Fas ligandにATL細胞特異性をもたせるためHIVgp120とFas ligandのC末端を融合させたキメラ分子を作製した。この分子の発現ベクターをCos細胞にトランスフェクトし、その培養上清をJurkat,ED(ATL由来細胞株)に添加し、アポトーシスの誘導をみた。コントロールのFas ligandと比較しキメラ分子ではアポトーシス誘導能が約1/10まで低下していた。これはキメラ分子がアポトーシス誘導に必要な三量体形成ができないためと考えられた。今後、三量体形成可能なキメラ分子の作製、Fas ligand発現を誘導できる(Tet-on system)ベクターの細胞への導入などの実験を進めていく予定である。