高機能化ミクロ肝臓を用いた体外循環式肝補助装置開発の基礎的研究

利用高功能微肝脏开发体外循环肝脏支持装置的基础研究

• 批准号: 13877251
• 负责人: 松下 通明
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877251/
• 关键词: 混合ミクロ肝臓; バイオ人工肝臓; 肝細胞混合スフェロイド; 人工肝臓; ミクロ肝臓

ラット肝細胞を独自の方法で単離した後、当研究室で確立した手法で混合ミクロ肝臓を作成した。この混合ミクロ肝臓の担体への固定化法を昨年に引き続き検討し、高機能化目的に、体外循環型人工肝臓モジュールへ充填して、以下の成果を得た。1.担体へのミクロ肝臓の固定化直径3mmの3層の親水性カプセルを作製した。この3層は、3%アガロースとVitamin E oilを用いることにより創出した。この親水性カプセル内に混合ミクロ肝臓を封入・固定化し、培養条件下で機能維持実験を行った。固定化混合ミクロ肝臓内の肝細胞に見られる小vesicleは、培養後数日で消失し、安定した固定化ミクロ肝臓が得られた。アルブミン分泌能および尿素合成能は一定に保たれた。2.体外循環型人工肝臓モジュール灌流実験酸素運搬体pyridoxalated-hemoglobin-polyoxyerhylene conjugate (PHP)を灌流液中に50%濃度混和し、2チャンネル型中空糸モジュール内に混合ミクロ肝臓を充填して実験を行なった。肝細胞充填量は、2gである。代謝能の判定にはアンモニア除去能で検討した。2時間での除去効率は約70%であり、効率的バイオ人工肝臓に混合ミクロ肝臓の応用が期待される結果であった。

The method for producing hepatocytes was developed separately and then mixed in the laboratory. This method of immobilization of hybrid liver support was used to investigate the effects of high functional efficiency, extracorporeal circulation artificial liver filling, and the following results were obtained 1. Preparation of 3-layer hydrophilic film with immobilized diameter of 3mm on the support. 3 layers of Vitamin E oil, 3%. The hydrophilic mixture is encapsulated, immobilized and maintained under culture conditions. Immobilization of hepatocytes in the mixed culture was observed in small vesicles, and disappeared after a few days of culture. Immobilization of hepatocytes was observed in stable cells. The secretion of urea and its synthesis can be protected. 2. The CPL perfusion system contains pyridoxalated-hemoglobin-polyoxymethylene conjugate (PHP) at 50% concentration, and the CPL perfusion system is filled with CPL at 2% concentration. Liver cell filling volume, 2g. Determination of Metabolizable Energy is a process for determination of Metabolizable Energy 2. The removal rate of artificial liver was about 70%. The results were expected.

项目成果

大久保 尚, 他: "ミクロ肝臓(混合スフェロイド)の作製と機能〜Hybrid型人工肝臓開発に向けて〜"組織培養工学. 27(4). 139-142 (2001)

Takashi Okubo 等人：“微肝脏（混合球体）的制备和功能 - 走向混合人工肝脏的发展 -”组织培养工程 27（4）。

Okubo H, et al.: "Noble method for firster formation of rat mixed liver spheroids"Artif Organs. 26(6). 497-505 (2002)

Okubo H 等人：“首次形成大鼠混合肝球体的高贵方法”Artif Organs。

Okubo H.: "Novel method for faster formation of rat liver cell spheroid"Artificial Organs. (In press). (2002)

Okubo H.：“更快形成大鼠肝细胞球体的新方法”人工器官。

Okubo H.: "Maintenance of morphology and function of mixed liver cell spheroids under collagen gel environment"Journal of Artificial Organs. 4. 331-335 (2001)

Okubo H.：“胶原凝胶环境下混合肝细胞球体形态和功能的维持”人工器官杂志。

Kamachi H.: "Rat small hepatocytes for liver support ; the growth and metabolic activities in culture"J Artificial Organs. (In press). (2002)

Kamachi H.：“用于肝脏支持的大鼠小肝细胞；培养物中的生长和代谢活动”J Artificial Organs。