薬物依存形成に関与する分子群の簡便な検索法の確立および応用

药物依赖性形成分子基团简易搜索方法的建立及应用

基本信息

批准号：
15659018
负责人：
鍋島俊隆
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

メタンフェタミンは我が国において最も乱用されている依存性薬物である。しかし、メタンフェタミンが薬物依存を引き起こす機構については、ほとんど分かっていなかった。我々は、平成12年度から5年間、文科省科学技術振興調整費による研究助成を受け、『依存性薬物により誘発される精神障害の機構の解明の研究』をテーマに研究班を組織し、薬物依存に関する研究を行ってきた。これまでの研究によって本研究班から、薬物依存関連遺伝子としてtumore necrosis factor-α(TNF-α)およびtissue plasminogen activatorを見出した。しかし、それらの遺伝子を見つけるためには、依存モデル動物を用いて、脳内での発現変化や行動薬理学的な検討を行わなければならず、多くの薬物依存関連遺伝子候補タンパクをスクリーニングすることは、時間的にも費用面においても不可能に近い。当萌芽研究ではその問題を解決するため、培養細胞を用いて簡易に薬物依存関連遺伝子候補タンパクをスクリーニングできる薬物依存モデルの確立を目指した。15および16年度は、ドパミン様の細胞株や神経細胞初代培養細胞に対してメタンフェタミンを添加した際のドパミン遊離の反応性を検討していたが、マウスなどにメタンフェタミンを投与した時のようなシャープな増加は観察されなかった。そこで、17年度は、ドパミン合成酵素および受容体を発現している細胞株であるPC12細胞にドパミントランスポーター遺伝子を導入し、発現した細胞についてクローニングを行った。その結果、恒常的にドパミントランスポーターを過剰に発現する細胞の確立に成功した。この細胞では、メタンフェタミンを添加後30から60分後に著しいドパミンの遊離量の増大が観察された。我々が、動物実験において、メタンフェタミンによるドパミン遊離を調整することをすでに確認している遺伝子のいくつかについて、本確立細胞でも結果を再現することが出来た。

甲基苯丙胺是我国最受虐的成瘾药物。然而，对于甲基苯丙胺引起吸毒的机制知之甚少。从2000年开始的五年来，我们一直致力于教育，文化，体育，科学和技术促进协调基金的研究赠款，并组织了一个研究团队，主题是“关于阐明因成瘾性药物引起的精神障碍机制的研究的主题》，以进行有关药物成瘾研究的研究。通过先前的研究，该研究组发现肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和组织纤溶酶原激活剂是药物依赖性相关基因。但是，为了找到这些基因，有必要使用动物模型在大脑中进行表达和行为药理检查的变化，并且在时间和成本方面，几乎不可能筛选许多与药物依赖性相关基因的候选蛋白。为了解决这个问题，我们的胚胎研究旨在建立一个依赖药物的模型，该模型允许使用培养细胞轻松筛选与药物依赖基因相关的候选蛋白。在2015年和2016年，我们调查了多巴胺释放的反应性，当时将甲基苯丙胺添加到多巴胺样细胞系和原发性培养的神经元细胞中时，没有观察到急剧增加，就像将甲基苯丙胺施用到小鼠中等时。被克隆。结果，组成性过表达多巴胺转运蛋白的细胞成功建立了。在该细胞中，添加甲基苯丙胺后30至60分钟观察到自由量的多巴胺显着增加。在动物研究中，我们已经确认通过甲基苯丙胺释放多巴胺的一些基因来复制我们已建立的细胞中的结果。