自然免疫型アトピー性皮膚炎の機能ゲノム学的解析

先天免疫特应性皮炎的功能基因组分析

基本信息

批准号：
15659262
负责人：
水谷仁
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659262/
关键词：
アトピー性皮膚炎 IL-18 カスパーゼ自然免疫マイクロアレイ IL-1 マスト細胞 caspase-1

项目摘要

本年度は昨年度行った自然免疫型アトピー性皮膚炎モデルマウスである特異的カスパーゼ1トランスジェニックマウス(KCASP1Tg)表皮で発現する遺伝子の網羅的解析にくわえて、同じく我々が開発した自然免疫型アトピー性皮膚炎モデルマウスIL-18トランスジェニックマウス(KIL-18Tg)についても同腹の対照マウスより得た表皮で発現する遺伝子の解析を試みた。正常対照およびKCASP1Tg, KIL-18Tg皮疹部皮膚から行いアトピー性皮膚炎発症条件における遺伝子の発現プロフィールをスクリーニングした発現強度4倍以上10倍以下のもの10数個には皮膚炎症に関連する可能性のある遺伝子が数個含まれていた。これらをアトピー性皮膚炎病因候補遺伝子とし、とくに両マウスに共通し強度10倍程度で機能的に重要と思われる1遺伝子を選んだ、その配列情報に基づいてプライマー、プローブをデザインし全配列を確認した。ついで、そのファミリー遺伝子数個を選んで、同様に発現があることを確認した。今回同定した遺伝子のmRNA発現をPCRにて半定量的に検出するとともに、特異的抗体を用いてKCASP1Tg皮疹部での発現増加を免疫組織学的に確認した。ELISAによる定量的解析、培養皮膚における発現量などを定量的に解析し、同物質が自然免疫型アトピー性皮膚炎病巣部で高発現していることを確認した。さらに、本物質により誘導されると予測される皮膚の病理学的変化について、免疫組織学的に検索し、アトピー性皮膚炎発症に強く関連することを確認した。今後、同遺伝子の高発現モデル作成による同物質のin vivoでの解析ならびにヒトのアトピー性皮膚炎皮膚での発現の検討を予定している。

除了对特异性caspase 1转基因小鼠（KCASP1TG）表达的基因的全面分析，这是我们去年进行的先天免疫性特应性皮炎的模型模型，我们还试图分析在IL-18型转基因小鼠的表观中表达的基因（同时由IL-18TG）（同时由IL-18TG）进行分析。从正常对照组和KCASP1TG和KIL-18TG皮肤中筛选了十种正常对照和基因的表达谱，并且在发育特应性皮炎条件下的基因表达谱从特应性性皮炎的样本中筛选出来，并且表达强度是4次，并且可能是4次，并且可能与几个可能的基因相关，从而筛选了基因的表达谱。这些被用作特征性皮炎的候选基因，并且选择了这两种小鼠尤其常见的基因，并且在功能上很重要，强度约为10次。基于序列信息设计了引物和探针，以确认整个序列。然后，选择了几个家庭基因并确认它们类似地表达。在这项研究中鉴定的基因的mRNA表达是通过PCR半定量检测的，使用特定的抗体证实了KCASP1TG喷发区域的表达增加。使用ELISA和对培养皮肤表达量的定量分析的定量分析证实在先天免疫型特应性皮炎的病变中高度表达。此外，对皮肤中的病理变化进行了免疫组织化学搜索，这些变化被预测，这些变化被该物质诱导，并确认它们与特应性皮炎的发展密切相关。将来，我们计划通过创建同一基因的高度表达模型来分析体内物质，并研究人类特应性皮肤炎皮肤中同一物质的表达。