前庭感覚上皮由来細胞による蝸牛感覚細胞の再生

前庭感觉上皮细胞再生耳蜗感觉细胞

基本信息

批准号：
15659405
负责人：
中川隆之
金额：
$ 1.86万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、成熟した前庭感覚上皮から内耳幹細胞あるいは内耳感覚上皮前駆細胞といえる性質を持つ細胞株を樹立する方法を開発し、蝸牛感覚上皮再生のための移植細胞とする方法を開発することを目的とした研究課題である。初年度に生後の成熟した前庭感覚上皮から増殖能力のある細胞を分離培養できることが分かったが、細胞株化することがきわめて困難であることが判明した。一方、マウス蝸牛内に細胞移植する手術手技の開発を行った。昨年度には、成熟した前庭感覚上皮に存在すると考えられる内耳幹細胞の増殖効率を上げる方法を開発する目的で、詳細な内耳感覚上皮における細胞増殖機構の解析を行い、細胞株化が図れる時期の内耳感覚上皮では、活発にWnt/beta-catenin情報伝達系が活性化されているが、生後には全く活性化が認められなかった。本年度は、内耳幹細胞の性質保持および増殖抑制機構に関連している分子として、ノッチ情報伝達系に着目し、胎生期および成熟後の内耳感覚上皮におけるノッチ情報伝達系の抑制による細胞増殖に関する解析を行った。結果、Wnt/beta-catenin情報伝達系の活性が低下している胎生中、後期の内耳感覚上皮でも、ノッチ情報伝達系を抑制することにより、感覚上皮における細胞増殖が活性化されることが判明した。しかし、この活性化も生後急速に減弱することが判明した。これらの結果から、1)前庭感覚上皮における幹細胞様性質を有する細胞の厳密な同定およびこの細胞を効率よく回収するための方法の開発2)加齢に伴う細胞増殖活性の低下に関する分子機構の解明が必要であると考えられた。

这项研究旨在开发一种可以从成熟的前庭感觉上皮中的细胞系建立一个可以称为内耳干细胞或内耳感觉上皮祖细胞的细胞系的方法，并开发一种用于移植细胞的方法，以用于耳蜗感觉上皮再生。发现第一年可以从成熟的后前庭感觉上皮中分离并培养增殖细胞，但发现将它们变成细胞系非常困难。同时，我们开发了一种将细胞移植到小鼠耳蜗中的手术技术。去年，我们对内耳感觉上皮中的细胞增殖机制进行了详细的分析，目的是开发一种方法来提高内耳干细胞的生长效率，这些方法被认为存在于成熟的前庭感觉上皮中，尽管Wnt/beta-catenin信号系统在细胞上的表现不断激活。今年，我们将重点放在缺口信号系统上，是一种与维持内耳干细胞的特性相关的分子，并通过在胎儿寿命和成熟后抑制内耳感觉上皮中的凹口信号系统来抑制细胞的增殖。结果，发现在感觉上皮中的细胞增殖也通过抑制内耳感官上皮的胎儿信号系统和晚期阶段来激活，其中Wnt/beta/beta-catenin信号系统的活性减少了。但是，该激活也被发现在出生后迅速减弱。这些结果表明，有必要1）严格识别前庭感觉上皮中具有干细胞样性能的细胞，并开发有效恢复这些细胞的方法2）阐明与年龄相关的细胞增殖活性下降相关的分子机制。