内耳有毛細胞の感覚毛に局在する聴覚受容イオンチャネル遺伝子の同定と機能解析

内耳毛细胞感觉毛中听觉受体离子通道基因的鉴定和功能分析

• 批准号: 16650078
• 负责人: 島田 昌一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16650078/
• 关键词: 感覚毛; TRP; OTRPC4; ASIC; 有毛細胞; 内耳; Western blot; 免疫組織化学

内耳は微小器官であり生化学的な研究が難しく、内耳に特異的に発現する遺伝子の多くは重要な機能を担っているにも関わらずその研究が立ち遅れてきた。本研究では内耳の有毛細胞の感覚毛に特異的に局在する聴覚を受容する機械刺激応答性イオンチャネル遺伝子の同定を目指し、マウス内耳有毛細胞cDNAライブラリーを作製し、TRPファミリーおよびASICファミリーと相同性を示す遺伝子をスクリーニングしてきた。これらの中でASICファミリーに属する遺伝子のスプライシングバリアントが、内耳有毛細胞に発現していることを見いだした。ウサギを用いて特異的な抗体を作製し、免疫組織化学的な解析を行ったところ、このクローンは蝸牛の内有毛細胞と外有毛細胞の感覚毛に特異的に蛋白が局在していた。さらに、免疫電顕法で詳しく解析すると有毛細胞の感覚毛の根本に免疫陽性構造の局在が認められた。また、このクローンのイオンチャネルとしての特性をアフリカツメガエル卵母細胞に発現させて解析してみると、陽イオンチャネルの活性が浸透圧に感受性を示すことが明らかになった。また、薬理学的にこのイオンチャネルはアミロライドで抑制されることが分かった。これらの結果から、このイオンチャネルは内耳有毛細胞の感覚毛に発現し、機械刺激感受性(浸透圧感受性)を示し、アミロライドで抑制されることから、聴覚受容に関与する機械刺激応答性イオンチャネルの有力候補であることが分かった。

Inner ear は miniorgans で あ り な biochemistry study が difficult し く, inner ear に specific に 発 now す る heritage 伝 son の く more important function of な は を bear っ て い る に も masato わ ら ず そ の research が made ち 遅 れ て き た. This study で は sense of inner ear hair cells の have の 覚 MAO に specific に bureau in す る hearing を by let す る 応 answer to mechanical stimuli イ オ ン チ ャ ネ ル posthumous son 伝 の with fixed を refers し, マ ウ ス inner ear hair cells with cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を as し, TRP フ ァ ミ リ ー お よ び ASIC フ ァ ミ リ ー と identity を shown す heritage 伝 son を ス ク リ ー ニ ン グ し Youdaoplaceholder0 た た. こ れ ら の で in ASIC フ ァ ミ リ ー に genus す る posthumous son 伝 の ス プ ラ イ シ ン グ バ リ ア ン ト が, inner ear hair cells に 発 now し て い る こ と を see い だ し た. ウ サ ギ を with い て specific antibody を な な parsing of し, immunohistochemical を line っ た と こ ろ, こ の ク ロ ー ン は snail の is hair と sense of outer hair cells have の 覚 MAO に specific protein に が bureau in し て い た. さ ら に, immune 顕 method で detailed し く parsing す る と has the feeling of hair cells の 覚 MAO の fundamental に immune positive tectonic の bureau at が め ら れ た. ま た, こ の ク ロ ー ン の イ オ ン チ ャ ネ ル と し て の features を ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル oocytes に 発 now さ せ て parsing し て み る と, Yang イ オ ン チ ャ ネ ル の active が soak 圧 に susceptibility を shown す こ と が Ming ら か に な っ た. ま た, 薬 neo-confucianism に こ の イ オ ン チ ャ ネ ル は ア ミ ロ ラ イ ド で inhibit さ れ る こ と が points か っ た. こ れ ら の results か ら, こ の イ オ ン チ ャ ネ ル は sense of inner ear hair cells have の 覚 MAO に 発 し, mechanical stimulation sensitivity (soak 圧 susceptibility) を し, ア ミ ロ ラ イ ド で inhibit さ れ る こ と か ら, hearing capacity に masato and す る 応 answer to mechanical stimuli イ オ ン チ ャ ネ ル の powerful backup で あ る こ と が points か っ た.

项目成果

Evans blue is a specific antagonist of the human epithelial Na+ channel delta-subunit.

伊文思蓝是人上皮 Na 通道 δ 亚基的特异性拮抗剂。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 315
• 作者: Yamamura H.;et al.
• 通讯作者: et al.

Functional analysis of acid sensing ion channels

酸敏感离子通道的功能分析

• 发表时间: 2004
• 期刊: Japanese Journal of Neuropsychopharmacology 24
• 作者: Shimada S.;et al.
• 通讯作者: et al.

Capsazepine is a novel activator of the delta subunit of the human epithelial Na^+ channel.

Capsazepine 是人上皮 Na+ 通道 δ 亚基的新型激活剂。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Biological Chemistry 279
• 作者: Yamamura H.;et al.
• 通讯作者: et al.

Histopathologic evaluation of the internal limiting membrane surgically excised from eyes with diabetic maculopathy

• DOI: 10.1097/00006982-200504000-00010
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: RETINA-THE JOURNAL OF RETINAL AND VITREOUS DISEASES
• 影响因子: 3.3
• 作者: Matsunaga, Noriko;Ozeki, Hironori;Ogura, Yuichiro
• 通讯作者: Ogura, Yuichiro

イオンチャネル最前線update

离子通道前沿更新

• 发表时间: 2005
• 作者: Cevik S;et al.;Nozoye T;堅田利明;稲野辺 厚
• 通讯作者: 稲野辺 厚