パーキンソン病誘発毒素を特異的に取り込むドーパミントランスポーターの分子機構

特异性摄取帕金森病诱发毒素的多巴胺转运蛋白的分子机制

• 批准号: 05251210
• 负责人: 島田 昌一
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05251210/
• 关键词: ドーパミントランスポーター; 黒質; パーキンソン病; 取り込み; オートラジオグラフィー

我々はドーパミントランスポーターと相同性を示す新しいクローンを単離するためラット脳やウシ網膜のcDNAライブラリーをスクリーニングし、ドーパミントランスポーターとはアミノ酸で40〜50%の相同性を有するTP8、TP12、TP3031の3種類のcDNAを単離した。これらのクローンの中でTP8のmRNAの分布についてin situハイブリダイゼーション法により検討したところ、ドーパミンニューロンの存在する中脳の黒質緻密斑や腹側被蓋野、セロトニンニューロンの存在する背側縫線核、正中逢線核、ノルアドレナリンニューロンの存在する青斑核などのモノアミンニューロンの存在する神経核群に強い発現が認められた。そのほか運動神経核、嗅球、視床下部、小脳などにもTP8のmRNAの発現が認められた。次にTP8の基質を同定するためにアフリカツメガエル卵母細胞発現系を用い[^3H]ドーパミン、[^3H]セロトニン、[^3H]ヒスタミン、[^3]グルタミン酸、[^3H]アスパラギン酸、[^3H]GABA、[^3H]タウリン、[^3H]グリシン、[^3H]コリン、[^3H]アデノシン、[^3H]アスコルビン酸などの基質の取り込みを調べたが、どの基質も取り込まなかった。これらの結果よりTP8はドーパミントランスポーターではないが、ドーパミンニューロン存在部位で強く発現していることから、少なくともドーパミンによる神経伝達を修飾する重要な役割を担うトランスポーターである可能性が考えられた。また我々はパーキンソン病のようなドーパミン関連疾患において将来PET等で選択的なドーパミントランスポーターのイメージングを行うための基礎実験として、in vitroとex vivoのautoradiographyを行った。リガンドとして用いた[^<125>I]RTI-55はドーパミントランスポーターとセロトニントランスポーターの両者に対して高い親和性を示すが、セロトニントランスポーターに特異的なリガンドである無標識のクロミプラミンと[^<125>I]RTI-55を組み合わせて用いることにより、ドーパミントランスポーターを選択的に標識することに成功した。この条件下で明らかにしたドーパミントランスポーターの選択的結合部位は嗅結節、側坐核、尾状核、淡蒼球、視床下核、黒質緻密斑、腹側被蓋野などであった。これらの結合部位に関してはin vitroとex vivo autoradiographyの両者においてほぼ同様の結果が得られた。

We found that there were 40 ~ 50% identity between TP8, TP12 and TP3031 in the three types of cDNA. The distribution of TP8 mRNA in the middle of the brain was detected by the method of situs analysis, and the presence of TP8 mRNA in the middle of the brain was detected by the method of situs analysis, ventral tegmental field, dorsal suture nucleus, median suture nucleus. It has been recognized that the presence of the blue spot nucleus and the presence of the black spot nucleus are strongly present in the brain nucleus. The mRNA expression of TP8 in the motor nucleus, olfactory bulb, inferior optic bed, and small intestine was also recognized. Next, TP8's basic structure was identified, and the oocyte development system was used in [^3H]-based,[^3H]-based]-based,[^3H]-based,[^[^3H] The result is that TP8 has a strong presence in the presence of a small number of particles, and the presence of a small number of particles in the presence of a small number of particles. The foundation for the development of a new technology, in vitro and vivo autography, is the development of a new technology, in vitro and vivo autography, in vitro and in vivo. The <125>RTI-55 has a high compatibility with the user interface and the user interface. <125>The RTI-55 has a unique combination of the user interface and the user interface. Under these conditions, the binding sites of the selected sites were olfactory tubercle, lateral sitting nucleus, caudate nucleus, suboptic nucleus, substantia nigra compact spot and ventral tegmental field. The binding site is related to the in vitro and ex vivo autoradiography.

项目成果

Fujita,M.: "Cellular localization of serotonin transporter mRNA in the rat brain." Neuroscience Letter. 163. 59-62 (1993)

Fujita,M.：“大鼠大脑中血清素转运蛋白 mRNA 的细胞定位。”

Gregor,P.: "Murine serotonine transporter:sequence and localization to Chromosome.11." Mammalian Genomic. 4. 283-284 (1993)

Gregor,P.：“小鼠血清素转运蛋白：11 号染色体的序列和定位。”

Fujita,M.: "Ontogeny of dopamine transporter mRNA expression in the rat brain." Molecular Brain Research. 19. 222-226 (1993)

Fujita,M.：“大鼠大脑中多巴胺转运蛋白 mRNA 表达的个体发育。”

Sato,K.: "Gene expression of KA type and NMDA receptors and of a glycine transporter in the rat pineal gland." Neuroendoclinology. 5. 77-79 (1993)

Sato,K.：“大鼠松果体中 KA 型和 NMDA 受体以及甘氨酸转运蛋白的基因表达。”

Mushiake,S.: "Gene for members of the GATA-binding protein family(GATA-GT1 and GATA-GT2)together with H+/K+-ATPase are spesifically transcribed in gastric parietal cells." FEBS Letter. (in press).

Mushiake,S.：“GATA 结合蛋白家族成员（GATA-GT1 和 GATA-GT2）的基因与 H /K -ATP 酶一起在胃壁细胞中特异性转录。”