新しいアルツハイマー病関連遺伝子LRP1Bの研究

新阿尔茨海默病相关基因LRP1B的研究

• 批准号: 16659086
• 负责人: 川市 正史
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659086/
• 关键词: LDL受容体ファミリー; PICK-1; JIP-1; JNK; 晩発性アルツハイマー病; 細胞内取り込み; グルタミン酸受容体; MAPキナーゼカスケード; LRP1B; JNKスカフォールド; PICK1; NPXYモチーフ; アミロイドβ; 遺伝子破壊マウス

LRP1Bによるシグナル伝達機構を明らかにするために、LRP1Bの細胞内部分に結合する蛋白質を酵母Two Hybrid法によりスクリーニングした結果、JNKシグナル伝達因子群のスカフォールドとなるJIP-1b、PZDドメインを持ち膜蛋白質の局在にかかわるPICK1、低分子量G蛋白質のRanBP9、などが単離された。種々の欠失変異体やアミノ酸置換変異体の解析から、LRP1Bは、C-末端の疎水性アミノ酸領域でPICK1のPZDドメインと結合し、またNPXYモチーフでJIP-1bと結合することが明らかになった。これらの結合様式は、既に知られているPICK1やJIP-1bと他の蛋白質との結合様式と一致しており、LRP1Bとの結合が生理的な意味を持ちうる可能性を強く示唆した。そこでまず、JIP-1bがJNKのスカフォールドとして機能し、JNK活性を変化させるか検討した。293T細胞をUVで刺激しJNKを活性化させる条件でJIP-1bを強制発現させたが、JIP-1bの有無によりJNKの活性化状態に大きな変化は見られなかった。次に、グルタミン酸受容体の細胞内取り込みをPKCα依存的に促進するPICK1について、同様の活性をLRP1Bに対して示すか、293T細胞の細胞表面に発現させたLRP1B受容体をビオチン化して細胞内取り込みを定量した。PICK1の発現の有無に関係なく、LRP1Bの細胞取り込みは非常に遅かった。このため、LRP1Bと非常に良く似たLRP1について同様な検討を行なった。LRP1はLRP1Bよりもずっと強くJIP-1bとPICK1に結合した。また、LRP1は、LRP1Bに比較し非常に早い速度で細胞内へ取り込まれた。以上の結果から、LRP1BとLRP1は非常に良く似た分子であるにかかわらず、受容体として異なる挙動をとることが明らかになった。

LRP1B によるシグナル伝Da mechanism を明らかにするために, LRP1B のcellular part にbinding するprotein をYeast Two Hybrid method results, JNK シグナル伝da factor group のスカフォールドとなるJIP-1b, The structure of PZD membrane protein is PICK1, low molecular weight G protein RanBP9, and などが単里された. Analytical analysis of various isoforms, acid-replacement isoforms, LRP1B, C-terminal aqueous methylamine field PI CK1のPZDドメインとcombinationし、またNPXYモチーフでJIP-1bとcombinationすることが明らかになった.これらのbinding様styleは、Jiに知られているPICK1やJIP-1bとhisのproteinとのbinding様The formula is consistent and the combination of LRP1B and physiological means is possible and strong.そこでまず、JIP-1bがJNKのスカフォールドとしてfunctionalityし、JNK active を変化させるか検した. 293T cells, UV stimulation, JNK activation, conditions, JIP-1b, forced appearance,たが、JIP-1bの有无によりJNKのactivated stateに大きな変化は见られなかった. Intracellular take-up of the acid receptor, PKCα-dependent promotion of PICK1, LRP1B The detection of LRP1B receptors on the cell surface of 293T cells and the detection of LRP1B receptors on the surface of 293T cells were carried out for quantitative analysis. There is no relationship between the presence or absence of PICK1 and LRP1B. The cells are very different.このため, LRP1B is very good and similar to たLRP1 について Same as 様な検検を行なった. LRP1はLRP1Bよりもずっと强くJIP-1bとPICK1にcombinationした.また、LRP1は、LRP1BにComparison is very early and the speed is the same inside the cell. The above results show that LRP1B and LRP1 are very good and similar molecules. The recipient is the same as the recipient.