アルコールによる膵障害発生の宿主側要因CEL多型と発生機序

宿主因素CEL多态性与酒精性胰腺损伤的发生机制

• 批准号: 16659191
• 负责人: 宮坂 京子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659191/
• 关键词: アルコール; 膵臓; CEL; 遺伝子; DNA; 膵炎; 遺伝子多型

CEL多型解析方法をJ Hum Genet (2002)に準じて(GenBank AF072711.1)セットアップした。PCR混合物は、トータル20μlでDNA20ng、67mM Tris-HCI (pH8.8)、16.6mM (NH_4)_2SO_4、5mMのMgCl_2、6.7μM EDTA、10mMα-メルカプトエタノール、1.5mMデオキシリボヌクレオシド三リン酸、2μlのジメチルスルホキシド、10pmolプライマーセット(forward : 5'-ACCAGGAGGCCACCCCTG-3' and reverse : 5'-TCCTGCAGCTTAGCCTTGGG-3')、そして、1unitのEx-Taq DNAポリメラーゼを含んでいる。PCRのサイクル条件は、94℃15分、続いて、94℃30秒、66℃30秒、72℃1分間を35サイクル行い、最後に72℃4分間をGene Amp PCR 9700 System用いて行った。PCR生成物は、12.5%のポリアクリルアミドゲルを用いて電気泳動して分離した。PCR産物がCEL geneであることを確認するため、クローニングし、確認した。結果は、CEL多型をNN(野生型)、NL,NS, SS,LL,SLの6種に分類できた。A.健常人、B.アルコール依存症とは診断をうけていないが、アルコールに起因する慢性膵炎と診断されている症例、C.アルコール依存症で膵障害を伴う症例、D.アルコール依存症で膵障害を伴わない症例、E.アルコールに起因しないと判断された慢性膵炎(家族性、胆石膵炎も含む)、F.膵障害を伴わない高脂血症6群で末梢血白血球よりDNAを抽出し、解析した。アルコール性慢性膵炎では、Lを持つ個体が他のすべてよりも高頻度にみとめられ、アルコールによる膵障害にCELの機能が関与する可能性を示す結果となった。

CEL polymorphic analysis method をJ Hum Genet (2002)に quasi-じ て(GenBank AF072711.1)セットアップ た た. PCR mixture ト, ト タ タ タ 20μlでDNA20ng, 67mM Tris-HCI (pH8.8), 16.6mM (NH_4)_2SO_4, 5mM <s:1> MgCl_2, 6.7μM EDTA, 10 mM alpha メ ル カ プ ト エ タ ノ ー ル, 1.5 mM デ オ キ シ リ ボ ヌ ク レ オ シ ド three リ ン acid, 2 mu l の ジ メ チ ル ス ル ホ キ シ ド, 10 pmol プ ラ イ マ ー セ ッ ト (forward: 5'-ACCAGGAGGCCACCCCTG-3' and reverse: 5'-TCCTGCAGCTTAGCCTTGGG-3'), そ て て, 1unit <s:1> x-taq DNAポリメラ そ ゼを ゼを containing んで る る. は PCR の サ イ ク ル conditions, 94 ℃ 15 points, 続 い て, 94 ℃ for 30 seconds, 66 ℃, 72 ℃, 30 seconds between 1 minute 35 サ を イ ク ル い, finally に を between 72 ℃ 4 Gene Amp PCR 9700 System using い て line っ た. The PCR products た and 12.5% <s:1> ポリア, リ, ア ア ア, ア, ドゲ, を were separated by <s:1> て electrokinetic <s:1> て and た た. PCR product がCEL geneである グ とを とを confirmation するため, <s:1> ロ ニ ニ ニ グ グ グ グ グ, confirmation た. The results show that を, CEL polymorphs をNN(wild type), NL,NS, SS,LL,SL <s:1> six に classifications で た た. A. health human, b. ア ル コ ー ル dependent disease と は diagnosis を う け て い な い が, ア ル コ ー ル に cause す る さ diagnosis of chronic Cui inflammation と れ て い る cases, c. ア ル コ ー ル dependent disease で Cui handicap of を cases う, d. ア ル コ ー ル dependent disease で Cui handicap of を with わ な い cases, e. ア ル コ ー ル に cause し な い と judgment さ れ た chronic Cui inflammation ( Familial, gallstone 膵 inflammation (including む), F. Youdaoplaceholder0 disorder を accompanied by わな hyperlipidemia, 6 groups of で peripheral white blood cells よ, <s:1> DNAを extraction, <s:1> analysis, た. Chronic Cui of sex of ア ル コ ー ル で は, L を つ individual が he の す べ て よ り も high frequency に み と め ら れ, ア ル コ ー ル に よ る Cui handicap of に CEL の function が masato and す る possibility を す results indicated と な っ た.

项目成果

Enhanced gastric emptying of a liquid gastric load in mice lacking cholecystokinin-B receptor: a study of CCK-A,B, and AB receptor gene knockout mice

• DOI: 10.1007/s00535-003-1297-2
• 发表时间: 2004-04
• 期刊: Journal of Gastroenterology
• 影响因子: 6.3
• 作者: K. Miyasaka;M. Ohta;S. Kanai;Y. Yoshida;Norikazu Sato;A. Nagata;T. Matsui;T. Noda;A. Jimi;S. Takiguchi;Y. Takata;T. Kawanami;A. Funakoshi

Inactive Aldehyde Dehydrogenase-2 Increased the Risk of Pancreatic Cancer Among Smokers in a Japanese Male Population

• DOI: 10.1097/01.mpa.0000147084.70125.41
• 发表时间: 2005-03
• 期刊: Pancreas
• 影响因子: 2.9
• 作者: K. Miyasaka;T. Kawanami;H. Shimokata;S. Ohta;A. Funakoshi

Role of 5-HT1B receptors in entrainment disorder of Otsuka Long Evans Tokushima Fatty (OLETF) rats.

5-HT1B 受体在大冢龙埃文斯德岛脂肪 (OLETF) 大鼠夹带障碍中的作用。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Neuroscience 123
• 作者: Shimazoe T;Miyasaka K;et al.
• 通讯作者: et al.

Differences in ethanol ingestion between cholecystokinin-A receptor deficient and -B receptor deficient mice.

胆囊收缩素-A 受体缺陷型和胆囊收缩素-B 受体缺陷型小鼠之间乙醇摄入的差异。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Alcohol and Alcoholism
• 影响因子: 2.8
• 作者: K. Miyasaka;H. Hosoya;Saeko Takano;M. Ohta;Ayako Sekime;S. Kanai;T. Matsui;A. Funakoshi
• 通讯作者: A. Funakoshi

Carboxylester lipase gene polymorphism as a risk of alcohol-induced pancreatitis

• DOI: 10.1097/01.mpa.0000160960.21580.ml
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: PANCREAS
• 影响因子: 2.9
• 作者: Miyasaka, K;Ohta, M;Funakoshi, A
• 通讯作者: Funakoshi, A