权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

化学発光速度を指標とするリポソームの膜透過性の評価法の開発

建立以化学发光速率为指标评价脂质体膜渗透性的方法

基本信息

批准号：
17655028
负责人：
上舘民夫
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

1.エオシンYを用いる膜透過性の評価リボソームの内水相にペルオキシダーゼ(POD)を封入し、その外水相にエオシンYと過酸化水素を添加すると、エオシンYと過酸化水素は迅速に膜を透過し、内水相においてPODを触媒とする化学発光反応が進行した。そこで、リン脂質であるフォスファチジルコリンに対して30〜45%のコレステロール含量を有するリボソームにPODを封入し、発光応答曲線を測定した。その結果、コレステロール含量が増大するほど発光初期速度は減少した。この結果から、エオシンYの発光初期速度が膜透過性を反映することがわかった。2.ピレン法による膜流動性の評価コレステロール含量が増大するほど発光初期速度は遅くなる原因として、コレステロール含量が増大するほどリボソームの膜流動性が減少することが考えられる。そこで、30〜45%のコレステロール含量を有するリボソームに蛍光プローブであるピレンを加え、膜流動性を評価した。その結果、コレステロール含量が増大するほど、膜流動性が減少した。したがって、エオシンYの発光初期速度を用いる方法が膜透過性の評価法として利用できることが明らかになった。3.膜透過性の速度論的解析リボソーム内へのエオシンYと過酸化水素の透過と化学発光反応を考慮して、発光初期速度を表す速度式を解析した。その結果、発光初期速度は膜透過速度定数、反応速度定数および基質初濃度で表された。また、反応速度定数および基質初濃度が一定のとき、発光初期速度は膜透過速度定数に比例することがわかった。エオシンYの膜透過速度定数を求めたところ、3.02x10^<-3> s^<-1>の値になった。

1. Evaluation of the permeability of エオシンYを using いる membrane and エオボソームの inner water phaseルオキシダーゼ(POD)をsealed inし、その外水相にエオシンYとpass Acidified hydrogen is added, and super-acidified hydrogen is added to the membrane, and the internal water phase is catalyzed by POD, which is used to chemically react with light.そこで、リン Lipid であるフォスファチジルコリンに対して 30~45%のコレスThe content of テロール has been determined by sealing POD and measuring the light response curve. As a result, the content of コレステロール has increased greatly, and the initial speed of light has decreased.このRESULTS から、エオシンYの発Initial speed が film permeability をすることがわかった. 2. Comments on the fluidity of the film using the ピレン method and the はコレステロール content has increased and the initial light speed has been increased Due to the increase in the content of として and コレステロール, the するほどリボソームの film fluidity has been reduced, and the することが考えられる has been reduced.そこで, 30~45% のコレステロールcontent を有するリボソームに蛍光プローブであるピレンを加え, film fluidity をreview価した. As a result, the コレステロール content has increased, and the membrane fluidity has decreased.したがって、エオシンYの発とをいる method がevaluation method of film permeability として Use できることが明らかになった. 3. Analysis of membrane permeability velocity theory, analysis of permeability of superacidified water, chemical reaction of light, initial velocity of light, table of velocity formula, analysis of membrane permeability. The result, the initial speed of light, the film transmission speed, the reaction speed, and the initial concentration of the matrix are all shown in the table.また, the reaction speed is a fixed number, the initial concentration of the matrix is a certain number, the initial speed of the light is a fixed number of the film transmission speed, and the proportion is a certain number. The fixed number of membrane permeability of エオシンYの is determined by めたところ, 3.02x10^<-3> s^<-1>の値になった.