トランスジェニックゼブラフィッシュを用いた造血幹細胞の動態解析

報告者はゼブラフィッシュの腎臓SP細胞を用いた遺伝子発現解析(マイクロアレイおよび定量PCR)により、ゼブラフィッシュの造血幹細胞マーカー遺伝子の候補として細胞接着分子Jam1(junctional adhesion molecule 1)を見出した。ゼブラフィッシュのゲノムよりjam1のプロモーター領域を単離し、jam1プロモーター下で安定的にEGFPを発現するトランスジェニック系統(jam1:EGFP)を確立した。jam1:EGFPを用いて魚類の主要な造血組織である腎臓においてフローサイトメトリー解析を行った。その結果、GFP(+)細胞のうちの約15%が造血幹細胞分画(SP細胞)と重複しており、GFP(+)細胞に造血幹細胞が濃縮されていることが分かった。そこで次に、腎臓内のGFP(+)細胞の分布を蛍光顕微鏡下で観察したところ、GFP(+)細胞は腎臓内で両側性に分布する集合管の周囲に認められた。このことから魚類の腎臓では集合管が"造血幹細胞ニッチ"として造血幹細胞の維持に何らかの役割を果たしている可能性が示唆された。さらに、jam1(+)造血細胞の分布を発生過程においても調べたところ、jaml(+)造血細胞は受精5日目から集合管の前駆体である前腎管の後部に認められ、徐々に前方へ移動し、受精14日目には集合管のほぼ全域に分布することが明らかになった。また、報告者はモルフォリーノアンチセンスオリゴを用いた遺伝子機能解析により、jam1が造血幹細胞の前駆体であるヘマンジオブラストの移動、および造血幹細胞への分化に重要な役割を果たしていることを明らかにしている。これらの知見はゼブラフィッシュにおける造血幹細胞や造血幹細胞ニッチの機能を調べる上での基盤となり、今後の解析に寄与するものと考えられる。

報告者はゼブラフィッシュの腎臓SP細胞を用いた遺伝子発現解析(マイクロアレイおよび定量PCR)により、ゼブラフィッシュの造血幹細胞マーカー遺伝子の候補として細胞接着分子Jam1(junctional adhesion molecule 1)を見出した。ゼブラフィッシュのゲノムよりjam1のプロモーター領域を単離し、jam1プロモーター下で安定的にEGFPを発現するトランスジェニック系統(jam1:EGFP)を確立した。jam1:EGFPを用いて魚類の主要な造血組織である腎臓においてフローサイトメトリー解析を行った。その結果、GFP(+)細胞のうちの約15%が造血幹細胞分画(SP細胞)と重複しており、GFP(+)細胞に造血幹細胞が濃縮されていることが分かった。そこで次に、腎臓内のGFP(+)細胞の分布を蛍光顕微鏡下で観察したところ、GFP(+)細胞は腎臓内で両側性に分布する集合管の周囲に認められた。このことから魚類の腎臓では集合管が"造血幹細胞ニッチ"として造血幹細胞の維持に何らかの役割を果たしている可能性が示唆された。さらに、jam1(+)造血細胞の分布を発生過程においても調べたところ、jaml(+)造血細胞は受精5日目から集合管の前駆体である前腎管の後部に認められ、徐々に前方へ移動し、受精14日目には集合管のほぼ全域に分布することが明らかになった。また、報告者はモルフォリーノアンチセンスオリゴを用いた遺伝子機能解析により、jam1が造血幹細胞の前駆体であるヘマンジオブラストの移動、および造血幹細胞への分化に重要な役割を果たしていることを明らかにしている。これらの知見はゼブラフィッシュにおける造血幹細胞や造血幹細胞ニッチの機能を調べる上での基盤となり、今後の解析に寄与するものと考えられる。