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血管シュミレーションシステムを用いた黄体機能解析モデルの構築

利用血管模拟系统构建黄体功能分析模型

基本信息

批准号：
17658117
负责人：
宮本明夫
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

黄体は、大型の平滑筋層を有する血管が取り囲む外周部、筋層を持ち合わせない毛細血管が密集する内部、そして黄体付近の卵巣動脈部と複雑な構造で構成されている。申請者らはこれまで、「黄体周辺部の血流が黄体退行に先立ち増加し、退行シグナルの1つとなり黄体退行が誘発される」と提案してきた。昨年度は、卵巣動脈、黄体周辺部と黄体内部を想定して、それぞれ血管内皮細胞(EC)+血管平滑筋細胞(SMC)の2種混合(卵巣動脈)、EC+SMC+黄体化細胞(LC)の3種混合(黄体周辺部)、そしてEC+LCの2種混合(黄体内部)培養系を確立することに成功した。このモデルを用い、黄体退行因子であるPGF2αを添加し、NO合成酵素(eNOS)mRNA発現を検証したところ、PGF2αがeNOS mRNA発現を刺激できるのは、ECがLCと隣接する場合に限ることがわかり、細胞間コミュニケーションの重要性が示唆された。次年度は、黄体由来の細胞を単離するモデル構築を試みた。屠場由来の黄体を周辺部と内部に分類し、各部位から黄体由来ECを単離した。単離したECを形状・増殖率・含有因子によりCytokeratin positive EC(CK+EC)とCytokeratin negative EC(CK-EC)とした。・CK+およびCK-両細胞とも、EC特有の因子(CD31やTie2)を有することが明らかになった。・黄体内部より大型血管が多数存在する黄体周辺部でECが獲得しやすい傾向があった。・CK-ECはeNOSmRNA発現を有するのに対し、CK+ECはeNOS mRNAが発現しなかった。・細胞間接着や細胞間コミュニケーションに重要であるconnexinやcadherinのmRNA発現はCK-ECで高かった。以上から、PGFによる黄体退行検証in vitroモデルとして、CK-ECを用いた培養系が確立できた。

The corpus luteum, the large smooth tendons, the blood vessels, the peripheral, the hairy, the dense, the inner, the corpus luteum, the egg, the corpus luteum, the corpus luteum, the corpus luteum and the egg. The applicant said that the blood flow around the corpus luteum, the retrogression of the corpus luteum, the retrogression of the corpus luteum. Last year, egg, oocyte, corpus luteum, vascular endothelial cell (EC) + vascular smooth muscle cell (SMC) were mixed (egg motility), EC+SMC+ luteinized cell (LC) were mixed (luteal periphery), and luteal EC+LC (corpus luteum) were successfully established. The use of corpus luteum retrogression factor (PGF2 α), the addition of NO synthesis enzyme (eNOS) mRNA, the stimulation of PGF2 α (eNOS mRNA), the combination of EC and LC were used, and the importance of intracellular DNA was demonstrated. The origin of the corpus luteum and corpus luteum in the next year. Slaughterhouse origin "corpus luteum" weekly department "internal classification", each part of the corpus luteum origin EC isolation. The reproduction rate of the EC shape contains a factor of Cytokeratin positive EC (CK+EC) Cytokeratin negative EC (CK-EC) fertility. The specific factors (CD31Tie2) of CK+ and the specific factor of EC (CD31Tie2) were positive for CK-cell and CD31Tie2. Most of the large vessels in the corpus luteum are located in the periphery of the corpus luteum. The EC of the periphery of the corpus luteum is located in the periphery. There are some symptoms in CK-EC eNOSmRNA, and there are some problems in CK+EC eNOSmRNA. This is followed by an intercellular communication between two cells. One of the most important devices is the connexin cadherin mRNA. The CK-EC is highly sensitive. Above, PGF, corpus luteum retrogression, in vitro, corpus luteum, CK-EC, corpus luteum, corpus luteum.