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血管シュミレーションシステムを用いた黄体機能解析モデルの構築

利用血管模拟系统构建黄体功能分析模型

基本信息

批准号：
17658117
负责人：
宮本明夫
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

黄体は、大型の平滑筋層を有する血管が取り囲む外周部、筋層を持ち合わせない毛細血管が密集する内部、そして黄体付近の卵巣動脈部と複雑な構造で構成されている。申請者らはこれまで、「黄体周辺部の血流が黄体退行に先立ち増加し、退行シグナルの1つとなり黄体退行が誘発される」と提案してきた。昨年度は、卵巣動脈、黄体周辺部と黄体内部を想定して、それぞれ血管内皮細胞(EC)+血管平滑筋細胞(SMC)の2種混合(卵巣動脈)、EC+SMC+黄体化細胞(LC)の3種混合(黄体周辺部)、そしてEC+LCの2種混合(黄体内部)培養系を確立することに成功した。このモデルを用い、黄体退行因子であるPGF2αを添加し、NO合成酵素(eNOS)mRNA発現を検証したところ、PGF2αがeNOS mRNA発現を刺激できるのは、ECがLCと隣接する場合に限ることがわかり、細胞間コミュニケーションの重要性が示唆された。次年度は、黄体由来の細胞を単離するモデル構築を試みた。屠場由来の黄体を周辺部と内部に分類し、各部位から黄体由来ECを単離した。単離したECを形状・増殖率・含有因子によりCytokeratin positive EC(CK+EC)とCytokeratin negative EC(CK-EC)とした。・CK+およびCK-両細胞とも、EC特有の因子(CD31やTie2)を有することが明らかになった。・黄体内部より大型血管が多数存在する黄体周辺部でECが獲得しやすい傾向があった。・CK-ECはeNOSmRNA発現を有するのに対し、CK+ECはeNOS mRNAが発現しなかった。・細胞間接着や細胞間コミュニケーションに重要であるconnexinやcadherinのmRNA発現はCK-ECで高かった。以上から、PGFによる黄体退行検証in vitroモデルとして、CK-ECを用いた培養系が確立できた。

Corpus luteum は, large のを have smooth muscle layer する vascular が take り囲む peripheral department, reinforcement layer を hold ちわせない capillary が intensive する internal and そして corpus luteum pay nearly の egg department と巣 artery after 雑でな structure constitute されている. Applicants らはこれまで, "corpus luteum week の辺 department blood が corpus luteum regression に set ち first raised し, regression シグナルの 1 つとなり corpus luteum regression が発 lure される" と proposal してきた. Annual は yesterday, egg 巣 artery, corpus luteum weeks 辺と corpus luteum internal を scenarios して, それぞれ vascular endothelial cells (EC) + vascular smooth muscle cells (SMC) の two mixed 巣 artery (eggs), EC + SMC + luteinizing cell (LC) の three kinds of hybrid (corpus luteum weeks 辺 department), そして EC + LC の 2 hybrid (internal) corpus luteum すを training department established Youdaoplaceholder0 るとに success た. このモデルをい, corpus luteum regression factor である PGF2 alpha を add し, NO synthetase (eNOS) mRNA 発 now を検 card したところ, PGF2 alpha が eNOS MRNA 発を stimulus now できるのは, EC が LC と隣 meet する occasions に limit ることがわかり, intercellular コミュニケーションの importance が in stopping された. In the following year, を単, the corpus luteum originated from the を単 cells of するモデするモデ construction を test みた. The origin of the corpus luteum is を, the circumference of the 辺 part と, the internal に classification <s:1>, the various parts らら, the origin of the corpus luteum ECを単, the separation た. Youdaoplaceholder0 away from たECを shape · growth rate · contained factors によ <s:1> Cytokeratin positive EC(CK+EC)とCytokeratin negative EC(CK-ec)とた. · CK+およびCK- two cells とになった, EC specific <s:1> factor (CD31やTie2)を has するとがとが and らをになったになったになった. The majority of the よ large blood vessels が within the corpus luteum are present at する the 辺 part of the corpus luteum でECが has a tendency to acquire やす and があった. , CK - EC は eNOSmRNA 発を now have するのにし seaborne, CK + EC は eNOS mRNA が発 now しなかった. , between cells indirectly with やコミュニケーションに important である connexin や cadherin の mRNA 発は now CK - EC で high かった. Above から, PGF による corpus luteum regression 検 certificate in vitro モデルとして, CK - EC をいた education department が establish できた.