雌ウシの潜在能力を利用したホルモン処置を使わないダブル排卵モデルの確立

建立发挥奶牛潜力且无需激素治疗的双排卵模型

• 批准号: 15658079
• 负责人: 宮本 明夫
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15658079/
• 关键词: 卵胞発育; 卵胞閉鎖; 血管新生; 黄体; 血流; アンギオポエチン; ダブル排卵; ウシ; 卵胞選抜; カラードップラー超音波画像診断装置; 排卵; 細胞閉鎖

今年度は、乳牛の発情周期中の卵胞の発育と閉鎖に関わる血管新生と血流を制御する因子の解析を進めると同時に、第1卵胞波の時期に限定して、黄体が存在しない状況下でのダブル優性卵胞の発現とダブル排卵の起きる内分泌環境の詳細な解析を行った。1)血管構築に関わると考えられるアンギオポエチン(ANPT)とそのレセプターTie2の発現を各発育段階にある卵胞から得られた顆粒膜細胞で調べた結果、ANPT1は中卵胞以上の卵胞で急速に増加し、一方、ANPT2は急速に減少した。レセプターTie2の発現は変化しなかった。このことから、血管新生が激増する中卵胞以上で、むしろ血管を安定化させるといわれるANPT1が主なリガンドとなることから、顆粒膜細胞のANPT1は、血管新生ではなく、むしろエストロジェン合成と深く関わっている可能性が示唆された。2)ウシ卵胞液中のN型糖鎖の変換の第一段階を触媒するNアセチルグルコサミニルトランスフェラーゼI(GnT I.)活性を検索した結果、閉鎖卵胞液にその活性が高いことがわかり、卵胞の閉鎖過程とN型糖鎖の変換活性との関連が示唆された。3)乳牛の第1卵胞波の直径2mm以上の全ての卵胞の消長を、カラードップラー超音波診断装置を用いて、それらの基底膜の局所血流とともに詳細に調べた結果、閉鎖に向かう卵胞は、どのサイズにおいても血流がDay3を境に消失するのに対して、発育を続ける卵胞の血流は存続することを初めて実証した。4)LHサージの直前に優性卵胞を吸引除去(ダブル優性卵胞モデル)または、GnRH投与による誘起排卵(シングル優性卵胞モデル)直後から5日目まで、毎日8時間、15分間隔の連続採血を行い、LHとFSHのパルス状分泌を観察した。その結果、黄体が存在しない(プロジェステロン濃度が基底値)ダブル優性卵胞モデルでは、LHパルスが活発で、FSH濃度も若干高いことがわかった。

This year, the analysis of factors related to angiogenesis and blood flow regulation during oocyte development and occlusion in dairy cows is carried out. The detailed analysis of endocrine environment during oocyte development and ovulation initiation in the presence of luteal phase is carried out. 1)Vascultural-related factors include: (1) rapid increase in the number of ova above the ovum,(2) rapid decrease in the number of ovum above the ovum,(3) rapid increase in the number of ovum above the ovum,(4) rapid decrease in the number of ovum above the ovum,(5) rapid increase in the number of ovum above the ovum,(6) rapid decrease in the number of ovum above the ovum,(7) rapid increase in the number of ovum above the ovum,(8) rapid decrease in the number of ovum above the ovum,(9) rapid increase in the number of ovum above the ovum,(9) rapid increase in the number of ovum above the ovum,(9) rapid decrease in the number of ovum above the ovum. The appearance of Tie2 was changed. The possibility of angiogenesis in granular membrane cells and the possibility of angiogenesis in granular membrane cells is also discussed. 2) The first stage catalyst of N-type carbohydrate lock transformation in oocyte cytosol (GnT I.) The results of the activity assay, the activity of the caged egg cytosol, the activity of the caged egg cytosol, and the activity of the N-type carbohydrate lock were all shown. 3)In dairy cows, the first oocyte wave with a diameter of more than 2mm was used to detect the local blood flow in the basement membrane. The results of detailed adjustment were obtained. The blood flow in the oocyte was blocked. The blood flow in the oocyte disappeared on Day3. The blood flow in the oocyte was detected at the beginning of development. 4)LH and FSH were collected continuously at 8 hours a day, 15 minutes intervals, and LH and FSH secretion was observed. The results showed that luteal phase was present (basal concentration), LH was active, FSH concentration was high.

项目成果

Changes in follicular vascularity during the first follicular wave in lactating cows

• DOI: 10.1262/jrd.16092
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT
• 影响因子: 1.8
• 作者: Acosta, TJ;Hayashi, KG;Miyamoto, A
• 通讯作者: Miyamoto, A

Expression of mRNA for the angiopoietin-Tie system in granulosa cells during follicular development in cows

• DOI: 10.1262/jrd.50.477
• 发表时间: 2004-08-01
• 期刊: JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT
• 影响因子: 1.8
• 作者: Hayashi, KG;Berisha, B;Miyamoto, A
• 通讯作者: Miyamoto, A

Hayashi K, Acosta TJ, Tetsuka M, Berisha B, Matsui M, Schams D, Ohtani M, Miyamoto A.: "Involvement of angiopoietin-Tie system in bovine follicular development and atresia : mRNA expression in theca interna and effect on steroid secretion"Biology of Repro

Hayashi K、Acosta TJ、Tetsuka M、Berisha B、Matsui M、Schams D、Ohtani M、Miyamoto A.：“血管生成素-Tie 系统参与牛卵泡发育和闭锁：内膜 mRNA 表达及其对类固醇分泌的影响”

N-acetylglucosarminyltransferase I activity in bovine ovarian follicular fluids from dominant and atretic follicles.

来自优势卵泡和闭锁卵泡的牛卵巢卵泡液中 N-乙酰葡糖氨基转移酶 I 的活性。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Applied Glycoscience 51
• 作者: Nozaki H;Miyamoto A;Hayashi KG;Matsui M;Yoshida T;Matsuzawa T;Nakamura T;Arai I;Urashima T.
• 通讯作者: Urashima T.

Acosta TJ, Hayashi KG, Ohtani M, Schams D, Miyamoto A.: "Local changes in blood flow within the preovulatory follicle wall and early corpus luteum in the cows"Reproduction. 125(5). 759-767 (2003)

Acosta TJ、Hayashi KG、Ohtani M、Schams D、Miyamoto A.：“奶牛排卵前卵泡壁和早期黄体内血流的局部变化”复制。